Revision 1

#8336Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-ALK (Tyr1586) (3B4) Rabbit mAb 3348 20 µl 80 (NPM-ALK) 220 (ALK) kDa Rabbit IgG
Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb 5031 20 µl 115 kDa Rabbit IgG
Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb 4406 20 µl 125 kDa Rabbit IgG
Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 9145 20 µl 79, 86 kDa Rabbit IgG
Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb 4322 20 µl 90 kDa Rabbit IgG
Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 4370 20 µl 44, 42 kDa Rabbit IgG
Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 4060 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
Phospho-Src Family (Tyr416) (D49G4) Rabbit mAb 6943 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 14008 20 µl 155 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

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Description

The ALK Activation Antibody Sampler Kit provides an economical means to evaluate the activation status of multiple members of the ALK pathway, including phosphorylated ALK, Jak2, Jak3, Stat3, Stat5, PLCγ1, Akt, Src, and p44/42 MAPK. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Anaplastic lymphoma kinase (ALK) is a tyrosine kinase receptor for pleiotrophin (PTN), a growth factor involved in embryonic brain development (1-3). In ALK-expressing cells, PTN induces phosphorylation of both ALK and the downstream effectors IRS-1, Shc, PLCγ, and PI3 kinase (1). ALK was originally discovered as a nucleophosmin (NPM)-ALK fusion protein produced by a translocation (4). Investigators have found that the NPM-ALK fusion protein is a constitutively active, oncogenic tyrosine kinase associated with anaplastic lymphoma (4). Research literature suggests that activation of PLCγ by NPM-ALK may be a crucial step for its mitogenic activity and involved in the pathogenesis of anaplastic lymphomas (5).
A distinct ALK oncogenic fusion protein involving ALK and echinoderm microtubule-associated protein like 4 (EML4) has been described in the research literature from a non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line, with corresponding fusion transcripts present in some cases of lung adenocarcinoma. The short, amino-terminal region of the microtubule-associated protein EML4 is fused to the kinase domain of ALK (6-8).

  1. Stoica, G.E. et al. (2001) J Biol Chem 276, 16772-9.
  2. Iwahara, T. et al. (1997) Oncogene 14, 439-49.
  3. Morris, S.W. et al. (1997) Oncogene 14, 2175-88.
  4. Morris, S.W. et al. (1994) Science 263, 1281-4.
  5. Bai, R.Y. et al. (1998) Mol Cell Biol 18, 6951-61.
  6. Rikova, K. et al. (2007) Cell 131, 1190-203.
  7. Takeuchi, K. et al. (2008) Clin Cancer Res 14, 6618-24.
  8. Soda, M. et al. (2007) Nature 448, 561-6.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    Select antibodies in this kit are sold under a license from Chemicon International, Inc. relating to U.S. Patent No. 5,658,791.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #8336

    ALK Activation Antibody Sampler Kit

    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from serum-starved A431 cells treated with hEGF (100 ng/mL, 5 min.) using Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb #14008. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060 对经过 Calyculin A（100 uM，30 分钟）处理的 Jurkat 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb #4322 对经过 hIL-2（10 ng/mL，O/N）处理的血清饥饿 NK-92 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from serum-starved HeLa cells treated with TPA (400 nM, 4 hours) using Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例在 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb #9145（上图）、Stat3 (D3Z2G) Rabbit mAb #12640（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理或已经过 IFNa（#36000，100 ng/mL，5 分钟）或 IFNg（#80385，100 ng/mL，30 分钟）处理的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb #9145 对经过 IFN-α（100 ng/mL，5 分钟）处理的血清饥饿 HeLa 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下），对未经处理 (-) 或经 hPDGF-BB #8912 刺激（5分钟；+）的 NIH/3T3 细胞、未经处理 (-) 或经 hEGF #8916 刺激（5 分钟；+）的 A-431 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-ALK (Tyr1586) (3B4) Rabbit mAb（A 和 B）和 ALK Antibody（C 和 D）,对 Sup-M2 细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。该抗体的磷酸化特异性在蛋白质印迹实验转移后，用牛小肠磷酸酶 (CIP)（B 和 D）处理的膜进行确定。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb（上）或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691（下），对未经处理或经 LY294002/Wortmannin 处理的 PC-3 细胞、经血清饥饿或 PDGF 处理的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb，对未经处理或经红细胞生成素处理（EPO；3 单位/ml，5 分钟）的 UT-7 细胞、未经处理或经 Human Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor #8922 处理（hGM-CSF；100 ng/ml，10 分钟）的 TF-1 细胞、未经处理或经 Human Interleukin-2 #8907 处理（hIL-2；100 ng/ml，10 分钟）的 NK-92 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370 和 p44/42 MAPK (Erk1/2) (3A7) Mouse mAb #9107，对未经处理或经 U0126 #9903（10 µM，1 小时）或 TPA #4174（200 nM，10 分钟）处理的 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-Jak2 (Tyr1007) (D15E2) Rabbit mAb（上）或总的 Jak2 (D2E12) Rabbit mAb #3230（下），对未经处理或经红细胞生成素处理（EPO；3 单位/ml；5 分钟）的 UT-7 细胞、未经处理的 HEL 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。HEL 细胞存在 Jak2 V617F 激活突变。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb（上）或 Jak3 Antibody #3775（下），对未经处理或经 Human Interleukin-2 (hIL-2) #8907 处理（10 ng/ml，15 分钟）的 NK-92 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Phospho-Src Family (Tyr416) (D49G4) Rabbit mAb（上）或 Src (36D10) Rabbit mAb #2109（下），对血清饥饿或经人 Platelet-Derived Growth Factor BB hPDGF-BB #8912 处理（100 ng/ml，15 分钟）的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb，对 IFN-α 处理的 Jurkat 细胞、Hela 细胞（左）、经 EGF 处理的 A431 细胞（右）提取物进行蛋白质印迹分析。注意，抗体可检测 A431 的基础磷酸化 Stat3。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（泳道 3），对经 hEGF #8916 刺激的 A-431 细胞提取物 phospho-PLCγ1 (Tyr783) 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    对经 Calyculin A #9902（100nM，30 分钟）处理的 Jurkat 提取物中的磷酸化 Akt (Ser473) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb，泳道 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP3® Isotype Control #3900。使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) XP® (D47E7) Rabbit mAb （绿色）和 Pan-Keratin (C11) Mouse mAb #4545（红色），对经 EGF 处理（左）或未经处理（右）的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb（上）或 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb #4695（下），对经 λ 磷酸酶或 TPA #4174 处理（如图）的 293 NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    对经人 IFN-α（50 ng/ml，15 分钟）处理的 U266 提取物中的磷酸化 Stat3 (Tyr705) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb。使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (3E2) Mouse mAb #9138 进行蛋白质印迹法分析。Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 用作二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色，低）或已经过 hGM-CSF #8922（50ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 TF-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb，对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对未经处理（蓝色）或已经 mPDGFbb（200ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 NIH/3T3 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb，对未经处理（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺神经内分泌癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 PTEN 杂合突变小鼠子宫内膜进行免疫组织化学分析。（组织切片由 Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的 Sabina Signoretti 博士惠赠）
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 对 SignalSlide™ Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) IHC Controls #8103（ 经过 U0126 #9903（左图）或 TPA #4174（右图）处理的石蜡包埋的 NIH/3T3 细胞）进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Phosho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Apc (min/+) 小鼠肠道进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb（左）或 PTEN (138G6) Rabbit mAb #9559（右），对石蜡包埋的 MDA-MB-468 异种移植物进行免疫组织化学分析。注意：PTEN 缺失型 MDA-MB-468 细胞存在 P-Akt 染色。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370（绿色）和 S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb #2317（红色），对未经处理（上）或经 λ 磷酸酶处理（下）的果蝇卵泡进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析，显示出胞核定位。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060，对经 SignalStain® Antibody Diluent #8112（左）和 TBST/5% Normal Goat Serum（右）对比处理的石蜡包埋人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370（绿色）和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700（红色），对饥饿过夜，然后用 U0126 #9903（10 uM，2 小时；左）或 PDBu (Phorbol 12,13-Dibutyrate) #12808（100 nM，15 分钟；右）处理的 HT1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb，对未经处理（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人乳腺癌（尤其是内皮细胞）进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对未经处理（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的 U-87MG 异种移植物进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对经 U0126（10 µM，2 小时；绿色）处理或经 TPA #4174 （200 nM，30 分钟；蓝色）处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 在 SignalSlide® HeLa -/+ IFNa IHC Controls #55861 上（对未经处理（左图）或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 处理（右图）的石蜡包埋的 Hela 细胞沉淀物）进行免疫组织化学分析。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    在 SignalSlide® Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101（未经处理（左图）或经过 LY294002 处理（右图）的石蜡包埋的 LNCaP 细胞）上使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    对 IFN-α 处理（左）或未经处理（右）Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析，用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb（绿色）标记。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或已经过 IFNα（50 ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 U266 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb（绿色），对经 LY294002 处理（左）或经胰岛素处理（右）的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin #8953（红色）进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5®#4084（DNA 荧光染料）。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 IRF1 内结合，IRF1 是 Phospho-Sata3 的一种已知靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（绿色）或已经过 LY294002 #9901、Wortmannin #9951 和 U0126 #9903（50 μM，1 μM 和 10 μM，2 小时；蓝色）处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
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    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) 对 3T3 细胞提取物进行免疫沉淀分析。细胞用 TPA（200 nM，15 分钟）处理。泳道 1 为 10% 输入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb。使用 Phosphop44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb #45262 作为二抗。
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    使用 SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit #56383，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml）处理30 分钟）的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663、human IRF1 promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    ALK Activation Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜后，用 IL-6（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Hep G2 细胞中提取的交联染色质，在加入 Phospho-Stat3 (Tyr705) (D3A7) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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