Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
25202S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠
通过采用与人 Tox 蛋白 Gln421 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
胸腺细胞选择相关的高迁移率族蛋白 (TOX) 是一种 DNA 结合的核因子,是进化型高迁移率族蛋白超家族 (HMG) 成员。TOX 还定义了一个包括 Tox2、Tox3 和 Tox4 的小亚家族,所有这些都在脊椎动物物种中高度保守,但具有独特的组织表达模式和功能(1,2)。
在阳性选择期间,Tox 在 T 细胞发育中发挥关键作用(3-5)。在 TOX 缺陷小鼠中的一项研究也揭示了对 CD4 T 细胞和 NK 细胞谱系发育中对 Tox 的要求,包括 NKT 细胞、FoxP3+ T 调节性 T 细胞和淋巴组织诱导剂 (LTI) 细胞 (6-8)。尽管 Tox 表达主要限于在正常组织中发育免疫细胞,但Tox 是由慢性病毒感染或癌症期间的高抗原刺激引起的,可调节 T 细胞的持久性和衰竭(9-12)。Tox 在皮肤 T 细胞淋巴瘤中也有异常表达(13-14)。
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