Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
81123S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | M |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
小鼠
使用重组小鼠 ASC/TMS1 蛋白对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
TMS1(甲基化诱导沉默的靶标)/ASC(含有 CARD 且与凋亡相关的斑点样蛋白)(也被称为 PYCARD 和 CARD5)是一个包含一个 N 末端 热蛋白域 (PYD) 和一个 C 末端 半光天冬梅酶募集区域 (CARD) 的 22-kDa 促凋亡蛋白 (1-2)。ASC/TMS1 基因最早被发现在乳腺癌细胞 (2) 中出现异常甲基化和沉默,随后被发现在其他一些癌细胞中沉默,包括卵巢癌 (3)、胶质母细胞瘤 (4)、黑色素瘤 (5)、胃癌 (6)、肺癌 (7) 和前列腺癌 (8)。促凋亡/炎症刺激会诱导 ASC/TMS1 表达 (9)。凋亡期间,ASC/TMS1 从胞质重分布到线粒体,并且结合线粒体 Bax,从而引发细胞色素 c 释放和随后的凋亡 (10)。ASC/TMS1 还被发现是炎症信号转导的一个关键组分,在炎症信号转导中受到促炎性信号刺激时结合并激活 caspase-1 (11)。
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