Revision 1

#4763Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
eIF4A (C32B4) Rabbit mAb 2013 20 µl 48 kDa Rabbit IgG
eIF4A1 Antibody 2490 20 µl 48 kDa Rabbit 
Phospho-eIF4B (Ser422) Antibody 3591 20 µl 80 kDa Rabbit 
eIF4B Antibody 3592 20 µl 80 kDa Rabbit 
Phospho-eIF4E (Ser209) Antibody 9741 20 µl 25 kDa Rabbit 
eIF4E (C46H6) Rabbit mAb 2067 20 µl 25 kDa Rabbit IgG
Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody 2441 20 µl 220 kDa Rabbit 
eIF4G (C45A4) Rabbit mAb 2469 20 µl 220 kDa Rabbit 
eIF4H (D85F2) XP® Rabbit mAb 3469 20 µl 25, 27 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit contains reagents to investigate the initiation of translation within the cell. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two Western blot experiments per primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

A variety of factors contribute to the important biological event of translation initiation. The Eukaryotic initiation Factor 4E (eIF4E) complex of translation initiation factors binds to the 5' m7 GTP cap to open up the mRNA secondary structure and allow small ribosome subunit binding (1). eIF4A, an eIF4 complex component that acts as an ATP-dependent RNA helicase, unwinds the secondary structure of the 5' mRNA untranslated region to mediate ribosome binding (2,3). EIF4E binds to the mRNA cap structure to mediate the initiation of translation (4,5). eIF4E interacts with eIF4G, a scaffold protein that promotes assembly of eIF4E and eIF4A into the eIF4F complex (5). eIF4B is thought to assist the eIF4F complex in translation initiation. eIF4H induces the RNA-dependent ATP hydrolysis catalyzed by the initiation factors eIF4A and eIF4B (2,6). eIF4H was further shown to determine the initial rate and extent of eIF4A-mediated mRNA secondary structure unwinding (7).

  1. Rogers, G.W. et al. (2001) J Biol Chem 276, 12598-608.
  2. Rogers, G.W. et al. (1999) J Biol Chem 274, 12236-44.
  3. Svitkin, Y.V. et al. (2001) RNA 7, 382-94.
  4. Sonenberg, N. et al. (1978) Proc Natl Acad Sci U S A 75, 4843-7.
  5. Gingras, A.C. et al. (1999) Annu Rev Biochem 68, 913-63.
  6. Richter-Cook, N.J. et al. (1998) J Biol Chem 273, 7579-87.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #4763

    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit

    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 eIF4A (C32B4) Rabbit mAb 对来自不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 eIF4E (C46H6) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody,对表达 GST-eIF4GI Ser1192Ala 或 GST-eIF4GI Ser1108Ala 突变体蛋白的 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。 (提供者为魁北克省蒙特利尔市 McGill 大学的 Brian Raught)
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 eIF4G (C45A4) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 eIF4A1 Antibody 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 eIF4H (D85F2) XP® Rabbit mAb 对 HepG2、HeLa 和 NBT-II 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-eIF4B (Ser422) Antibody(上图)或 eIF4B Antibody #3592(下图),对 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。在转染 siRNA 48 小时后,按规定用雷帕霉素 (50 nM) 和 U0126 (10 µM) 对细胞进行处理。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 eIF4B Antibody 对来自 HeLa 细胞、293 细胞和 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-eIF4E (Ser209) Antibody (上图) 或 EIF4E Antibody #9742 (下图),对未经处理或用血清、PD98059 或 Dexamethasone 处理的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 eIF4E (C46H6) Rabbit mAb #2067 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125,对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 、SignalSilence® eIF4E siRNA I #6311 或 SignalSilence® eIF4E siRNA II #6554 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。eIF4E (C46H6) Rabbit mAb 确认 eIF4E 表达的沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 被用于控制上样量及 eIF4E siRNA 的特异性。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody,对未经处理 (泳道 1) 的或经 NGF (10ng/ml) (泳道 2)处理的、 Anisomycin (25µM) (泳道 3)处理的、U0126 #9903 (10µM) (泳道 4)处理的、雷帕霉素 #9904 (100nM ) (泳道 5)处理的或 LY294002 #9901 (25µM) (泳道 6)处理的 PC12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 eIF4G (C45A4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人恶性胶质瘤进行免疫组织化学分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 eIF4H (D85F2) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞(左)和 MCF-7 细胞(右)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 eIF4E (C46H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody (绿色),对经雷帕霉素处理的 (左图) 或血清饥饿处理 (右图) 的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 eIF4G (C45A4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)存在的情况下,使用 eIF4E (C46H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 eIF4G (C45A4) Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Translation Initiation Complex Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用非特异性阴性对照抗体(红色)作为对照组,eIF4G (C45A4) Rabbit mAb(蓝色)对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。