Revision 1

#9383Store at -20C

1 个试剂盒

(4 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 2203 20 µl 48, 50 kDa Rabbit IgG
TCF3/TCF7L1 (D15G11) Rabbit mAb 2883 20 µl 78 kDa Rabbit 
TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 2569 20 µl 58, 79 kDa Rabbit IgG
LEF1 (C12A5) Rabbit mAb 2230 20 µl 25-58 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting total protein from the TCF/LEF1 family members. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two Western blots with each antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

LEF1 and TCF are members of the high mobility group (HMG) DNA binding protein family of transcription factors which consists of the following: Lymphoid Enhancer Factor 1 (LEF1), T Cell Factor 1 (TCF1, also known as TCF7), TCF3 (also known as TCF7L1) and TCF4 (also known as TCF7L2) (1). LEF1 and TCF1/TCF7 were originally identified as important factors regulating early lymphoid development (2) that act downstream in Wnt signaling. LEF1 and TCF bind to Wnt response elements to provide docking sites for β-catenin, which translocates to the nucleus to promote the transcription of target genes upon activation of Wnt signaling (3). LEF1 and TCF proteins are dynamically expressed during development and aberrant activation of the Wnt signaling pathway is involved in many types of cancers including colon cancer (4,5).

  1. Waterman, M.L. (2004) Cancer Metastasis Rev 23, 41-52.
  2. Schilham, M.W. and Clevers, H. (1998) Semin Immunol 10, 127-32.
  3. Brantjes, H. et al. (2002) Biol Chem 383, 255-61.
  4. Reya, T. and Clevers, H. (2005) Nature 434, 843-50.
  5. Logan, C.Y. and Nusse, R. (2004) Annu Rev Cell Dev Biol 20, 781-810.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #9383

    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit

    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb #2203红色）和 CD4 (RM4-5) Rat mAb (redFluor™ 710 Conjugate) #75508（蓝色），对野生型（左图）Tcf7GFP flox（右图；Jax 品系 030909）小鼠的固定冷冻淋巴结进行共聚焦免疫荧光分析。在 Tcf7 外显子 2 周围插入 EGFP 干扰了长同工型表达，但不干扰短同工型表达。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image

    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（左图）作为对照，使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（右图）和共染色的 CD3 (UCHT1) Mouse mAb (APC Conjugate) #19881 对人外周血单核细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb #2569 对 HepG2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例在 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb，对来自 HT29、Colo201、Jurkat 和小鼠胸腺细胞的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb 对 HCT15 细胞、DLD1 细胞和小鼠胸腺细胞的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    CUT&Tag was performed with HCT 116 cells and TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb, using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figure shows binding across MYC, a known target gene of TCF4 (see our ChIP-qPCR figure).
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 TCF3/TCF7L1 (D15G11) Rabbit mAb 对不同细胞系的总细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 HCT116 细胞中提取的交联染色质，在加入 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb#8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。已知 TCF4/TCF7L2 和 β-链蛋白可在染色质上相互结合。图形显示 TCF4/TCF7L2 和 β-链蛋白在 CAMK2D 内结合，已知 CAMK2D 是 TCF4 和 β-链蛋白的一种靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图形）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    CUT&Tag was performed with HCT116 cells and TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb, using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figures show binding across chromosome 8 (upper), including MYC (lower), a known target gene of TCF4 (see our ChIP-qPCR figure).
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    在对照肽（左图）或 TCF1/TCF7 Blocking Peptide #1007（右图）存在的情况下，使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 HCT116 细胞中提取的交联染色质，在加入 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb#8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。已知 TCF4/TCF7L2 和 β-链蛋白可在染色质上相互结合。结果图显示 TCF4 和 β-链蛋白在染色体 4（上图）内的结合，包括 TCF4/TCF7L2 和 β-链蛋白的已知靶基因 CAMK2D（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人扁桃体组织进行免疫组织化学分析。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（绿色）对 HCT-15 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝已用 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）进行标记。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003对 HCT 116 细胞中提取的交联染色质，在加入 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3Primers #5111、Human c-Myc promoter primers 与 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb（绿色）对 DLD-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image

    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（左图）作为对照，使用 LEF1 (C12A5) Rabbit mAb（右图）和共染色的 CD3 (17A2) Rat mAb (APC Conjugate) #24265 对小鼠脾脏进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit # 86652通过 HCT116 细胞和 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。图形显示在 MYC 内结合，MYC 是一种已知的 TCF4 靶标基因（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他图形）。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对 A20 细胞（蓝色）和 EL-4 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit # 86652通过 HCT116 细胞和 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 8（上图）内的结合，包括 TCF4 的已知靶基因 MYC（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过 HCT 116 细胞和 TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用人 PRKACB 内含子 1 引物、人 MYC 外显子 1 引物和人 ITM2A 上游引物通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    TCF/LEF Family Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对小鼠胸腺细胞的交联染色质和 TCF1/TCF7 (C63D9) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Mouse LEF1 Upstream Primers #80993 和 SimpleChIP® Mouse MYT-1 Promoter Primers #8985 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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