Revision 3
Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
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UniProt ID:

#Q9GZV5

Entrez-Gene Id:

25937

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Description

PhosphoPlus® Duets from Cell Signaling Technology (CST) provide a means to assess protein activation status. Each Duet contains an activation-state and total protein antibody to your target of interest. These antibodies have been selected from CST's product offering based upon superior performance in specified applications.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

TAZ is a transcriptional co-activator with a PDZ-binding motif that is regulated by its interaction with 14-3-3 proteins (1). TAZ shares homology with the WW domain of Yes-associated protein (YAP) (1). TAZ is proposed to modulate the switch between proliferation and differentiation of mesenchymal stem cells (MSC) via interaction with transcription factors Runx2 and PPARγ. This process is critical to normal tissue development and the prevention of tumor formation. Due to its role in determination of MSC fate, TAZ may have clinical relevance to several human diseases caused by an imbalance of MSC differentiation (2,3). TAZ is negatively regulated via phosphorylation by LATS1/2, core kinases in the Hippo signaling pathway that controls stem cell development, tissue growth and tumor development (4).
Phosphorylation of TAZ at Ser89 functions to destabilize TAZ protein by promoting 14-3-3 binding, cytoplasmic sequestration, and proteasomal degradation, thereby reducing the ability of TAZ to co-activate transcription of downstream target genes. Mutation of Ser89 to alanine (S89A) yields a constitutively active form of TAZ; expression of TAZ (S89A) in breast cancer cells was shown to promote a cancer stem cell phenotype (5).

  1. Kanai, F. et al. (2000) EMBO J 19, 6778-91.
  2. Hong, J.H. et al. (2005) Science 309, 1074-8.
  3. Hong, J.H. and Yaffe, M.B. (2006) Cell Cycle 5, 176-9.
  4. Lei, Q.Y. et al. (2008) Mol Cell Biol 28, 2426-36.
  5. Cordenonsi, M. et al. (2011) Cell 147, 759-72.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PhosphoPlus is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    Revision 3
    #80074

    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet

    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 1 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb(上图)、TAZ (D3I6D) Rabbit MAb #70148(中间)和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理 (-) 或已经牛小肠磷酸酶 (+) 处理的 PANC-1 和 A-204 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。星号 (*) 表示 TAZ (Ser89) 和 YAP (Ser127) 周围区域的序列相似性导致磷酸化 YAP 的检测较微弱。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 2 Expand Image
    使用 TAZ (E8E9G) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹法分析。细胞系中的 TAZ 表达水平与基于公开可用生物信息数据库的预期一致。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 3 Expand Image
    对源自 A-204 细胞提取物的 Phospho-TAZ (Ser89) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb。使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。星号 (*) 表示 TAZ (Ser89) 和 YAP (Ser127) 周围区域的序列相似性导致磷酸化 YAP 的检测较微弱。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 4 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物的 TAZ 蛋白进行的免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 TAZ (E8E9G) Rabbit mAb。使用 TAZ (D3I6D) 兔单克隆抗体 #70148 进行蛋白印迹分析。小鼠抗兔 IgG (构象特异) (L27A9) 单克隆抗体 (HRP 偶联物) #5127 用于检测,以免与 IgG 发生交叉反应。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 5 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人尿路上皮癌进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 6 Expand Image
    使用 Taz (E8E9G) Rabbit Mab(绿色)对低(左图)和高度融合(中图)MCF 10A 细胞(高表达)与 SH-SY5Y细胞(右图,低表达))进行的共聚焦免疫荧光分析。胞核用 DAPI #4083(蓝色)标记。请注意,在高融合度 MCF 10A 细胞中发现 TAZ 蛋白的核定位减少。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 SK-MEL-28 细胞沉淀物(左图,阳性)或 RL 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 8 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCI-H2052 细胞的交联染色质与 TAZ (E8E9G) Rabbit mAb #83669 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human CTGF Promoter Primers #14927、Human SMYD3 intron 2 primers 与 SimpleChIP® Human CTGF Upstream Primers #14928,通过实时 PCR对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb.对未经(左图)或经 λ 磷酸酶(右图)处理的石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb,对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    PhosphoPlus® TAZ (Ser89) Antibody Duet: Image 13 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢透明细胞癌进行免疫组织化学分析。