Revision 1

#93130Store at -20C

1 个试剂盒

(6 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 14994 20 µl 84, 91 kDa Rabbit IgG
Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 72604 20 µl 97, 113 kDa Rabbit IgG
Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 30835 20 µl 79, 86 kDa Rabbit IgG
Stat4 (C46B10) Rabbit mAb 2653 20 µl 81 kDa Rabbit 
Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 94205 20 µl 90 kDa Rabbit IgG
Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 5397 20 µl 110 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

Stat Antibody Sampler Kit II provides an economical means to examine the complete Stat family: Stat1-6. The kit contains enough a primary antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Jaks (Janus Kinases) and Stats (Signal Transducers and Activators of Transcription) are utilized by receptors for a wide variety of ligands including cytokines, hormones, growth factors and neurotransmitters. Jaks, activated via autophosphorylation following ligand-induced receptor aggregation, phosphorylate tyrosine residues on associated receptors, Stat molecules and other downstream signaling proteins (1,2). The phosphorylation of Stat proteins at conserved tyrosine residues activates SH2-mediated dimerization followed rapidly by nuclear translocation. Stat dimers bind to IRE (interferon response element) and GAS (gamma interferon-activated sequence) DNA elements, resulting in the transcriptional regulation of downstream genes (1,2). The remarkable range and specificity of responses regulated by the Stats is determined in part by the tissue-specific expression of different cytokine receptors, Jaks and Stats (2,3), and by the combinatorial coupling of various Stat members to different receptors. Serine phosphorylation in the carboxy-terminal transcriptional activation domain has been shown to regulate the function of Stat1, -2, -3, -4 and -5 (1). Phosphorylation of Stat3 at Ser727 via MAPK or mTOR pathways is required for optimal transcriptional activation in response to growth factors and cytokines including IFN-gamma and CNTF (4,5). Jak/Stat pathways also play important roles in oncogenesis, tumor progression, angiogenesis, cell motility, immune responses and stem cell differentiation (6-11).

  1. Darnell Jr., J. et al. (1994) Science 264, 1415-1421.
  2. Leonard, W.J. and O'Shea, J.J. (1998) Annu. Rev. Immunol. 16, 293-322.
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Background References

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #93130

    STAT Antibody Sampler Kit II

    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 1 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 (hIFN-γ) #8901（50 ng/ml，30 分钟）处理的 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用 human AIM2 promoter primers、human FZD5 promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 2 Expand Image
    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb #14994 对 MCF-7 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 3 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了 Stat1 的已知靶标基因 FZD5 基因内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
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    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HT-1080 细胞和 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在染色体 2（上图）内的结合，包括 Stat1 的已知靶标基因 FZD5 基因（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 5 Expand Image

    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from Jurkat cells using Stat6 (D3H4) Rabbit mAb #5397. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12 – 230 kDa separation module.

    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 6 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb（实线）对 K-562 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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    使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
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    使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb #94205 对 HDLM-2 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
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    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb #14994（上图）和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 A549 细胞（泳道 1）或 STAT1 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白印迹分析。STAT1 敲除型 A549 细胞中没有信号，这证实了抗体对 STAT1 的特异性。
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    使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb，对不同细胞系以及大鼠胸腺的提取物进行蛋白质印迹分析。
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    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
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    使用 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 13 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
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    使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。KARPAS细胞系来源：剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 15 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927（10nM，30 分钟）处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 GAS5 基因内结合。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 16 Expand Image
    使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb (上图) 与 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图)，对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
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    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
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    使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb，对ACHN、SR 与 Caki 细胞系以及大鼠胸腺的提取物进行蛋白质印迹分析。
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    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对转染空载 (-) 或使用针对小鼠 Stat3 (mStat3 siRNA; +) 的 siRNA 转染的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 20 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对饥饿过夜后用 IL-4（100 ng/ml；30 分钟）处理的 Ramos 细胞中提取的交联染色质，在加入 Stat6 (D3H4) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primers #7710、human MS4A1 promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 21 Expand Image
    对 KARPAS-299 细胞提取物中的 Stat2 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb。使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。KARPAS细胞系来源：剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 22 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8927（10nM，30 分钟）处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 1（上图）内的结合，包括 GAS5 基因（下图）。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 23 Expand Image
    使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染人全长 Stat5a (+) 或 Stat5b (+) 表达载体的 PC-3 细胞进行蛋白质印迹分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 24 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (泳道 2) 或 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb (泳道 3)，对MCF7 细胞提取物的 Stat1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Stat1 (9H2) Mouse mAb #9176 进行蛋白质印迹分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 25 Expand Image
    对 NK-92 细胞提取物的 Stat4 蛋白进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% input，泳道 2 仅为珠蛋白，泳道 3 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 4 是 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb。使用 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 26 Expand Image
    对来自 MCF7 细胞提取物的 Stat3 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb。使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。构象特异性二抗用来避免与 IgG 的反应性。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 27 Expand Image
    使用 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb（绿色），对血清饥饿（左图）或经 IFNα 处理（#1000，30 ng/mL，分钟；右图）的 A-431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 28 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927（10nM，30min）处理的 U266 细胞和 Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用人 SIN3A 启动子引物和人 ITM2A 上游引物通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 29 Expand Image
    对 K-562 细胞提取物Stat5 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input，泳道 2 经 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb。使用 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 30 Expand Image
    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 31 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞的交联染色质与 Stat4 (C46B10) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 Stat4 的已知靶基因 IRF1 内结合（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 32 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa 细胞沉淀物（左图，阳性）和 PC-3 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 33 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 IL-3 饥饿处理 6 小时后以 IL-3 诱导 45 分钟的 BaF3 细胞的交联染色质和 Stat5 (D2O6Y) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Mouse CIS Intron 1 Primers #5131、mouse SOCS-3 promoter primers 和 SimpleChIP® Mouse RPL30 Intron 2 Primers #7015，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 34 Expand Image
    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 35 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞的交联染色质与 Stat4 (C46B10) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 5（上图）内的结合，包括 Stat4 的已知靶标基因 IRF1（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 36 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 37 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 Stat2 的已知靶基因 USP18 内结合（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 38 Expand Image
    使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb (绿色) 与 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700 (红色)，对经过血清饥饿过夜（左图）处理，或经Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (1,000 单位/mL，30 分钟（右图) 处理的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 39 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 IL-2 饥饿过夜后用 IL-12 (10 ng/ml) 处理 4 小时的 NK-92 细胞中提取的交联染色质，在加入 Stat4 (C46B10) Rabbit mAb #2653 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、human PRF1 promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 40 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人非小细胞肺癌进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 41 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对经人源干扰素-α (IFN-α) #9906 (10nM) 处理 30 分钟的 U266 细胞的交联染色质和 Stat2 (D9J7L) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 22（上图）内的结合，包括 Stat2 的已知靶标基因 USP18（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 42 Expand Image
    以 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb（实线）对 ACHN 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 43 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人子宫内膜腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 44 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 Human Interferon-α (IFN-α) #9906 (100 ng/ml) 处理 30 分钟的 U266 细胞中提取的交联染色质，在加入Stat2 (D9J7L) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human USP18 promoter primers、SimpleChIP® Human WARS Intron 1 Primers #30101 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 45 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人前列腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 46 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901（50 ng/ml，30 分钟）处理的 HT-1080 细胞的交联染色质，与 Stat1 (D1K9Y) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 human IRF-1 promoter primers、SimpleChIP® Human TAP1 Promoter Primers #5148 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 47 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb（绿色）和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700（红色），对血清饥饿（左图）或经 Human Interleukin-6 (hIL-6) #8904（100 ng/mL，20 分钟；中间）处理的 HeLa 细胞（Stat3 阳性）或经 Human Interleukin-6 (hIL-6) #8904（100 ng/mL，20 分钟；右图）处理的 PC-3 细胞（Stat3 阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。
    Stat Antibody Sampler Kit II: Image 48 Expand Image
    使用 Stat3 (D1B2J) Rabbit mAb #30835（上图）或 β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970（下图）对 HeLa 对照细胞（泳道 1）或 Stat3 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。Stat3 敲除型细胞中没有信号，这证实了抗体对 Stat3 的特异性。
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