Revision 1

#9787Store at -20C

1 个试剂盒

(7 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody 2314 20 µl 120 kDa Rabbit 
SirT1 (D1D7) Rabbit mAb 9475 20 µl 120 kDa Rabbit IgG
SirT2 (D4O5O) Rabbit mAb 12650 20 µl 39, 43 kDa Rabbit IgG
SirT3 (D22A3) Rabbit mAb 5490 20 µl 28 kDa Rabbit IgG
SirT5 (D8C3) Rabbit mAb 8782 20 µl 30 kDa Rabbit IgG
SirT6 (D8D12) Rabbit mAb 12486 20 µl 42, 36 kDa Rabbit IgG
SirT7 (D3K5A) Rabbit mAb 5360 20 µl 45 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Sirtuin Antibody Sampler Kit provides an economical means of evaluating total levels of sirtuin proteins. The kit includes enough antibody to perform at least two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The Silent Information Regulator (SIR2) family of genes is a highly conserved group of genes that encode nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)-dependent protein deacetylases, also known as Class III histone deacetylases. The best characterized of these genes is Saccharomyces cerevisiae Sir2, which is involved in silencing of mating type loci, telomere maintenance, DNA damage response and cell aging (1). SirT1, the mammalian ortholog of Sir2, is a nuclear protein implicated in the regulation of apoptosis, cellular senescence, endocrine signaling, glucose homeostasis, aging, and longevity. SirT2, one of several mammalian Sir2 homologs, deacetylates α-tubulin on Lys40 and histone H4 on Lys16, and is implicated in cytoskeletal regulation and progression through mitosis (2,3). SirT2 protein is mainly cytoplasmic and is associated with microtubules and the HDAC6 tubulin deacetylase (2).

SirT3 exists in human cells in two forms, including a full-length, nuclear (44 kDa) protein and a processed (28 kDa) protein found exclusively in the mitochondria (4-6). Full-length SirT3 protein is processed in the mitochondrial matrix by mitochondrial matrix processing peptidase (MMP) (5). Both full-length and processed SirT3 are active enzymes that deacetylate histone H3 at Lys9 and histone H4 at Lys16 in vitro (4). SirT3 also deacetylates Lys642 of acetyl-CoA synthetase 2 (AceCS2) and activates AceCS2 activity in the mitochondria (7).

SirT5 is localized to the mitochondria and has been implicated in the regulation of cell metabolism (8,9). Nuclear SirT6 is a chromatin-associated protein that promotes normal maintenance of genome integrity as mediated by the base excision repair (BER) pathway (10-12). Mammalian SirT7 is localized to the nucleolus and is prominently expressed in hematopoietic cells, especially myeloid progenitor cells (13). SirT7 is recruited to chromatin by sequence-specific DNA binding transcription factors such as Elk-4, where it facilitates transcriptional repression through deacetylation of histone H3 at Lys18 (14).

  1. Guarente, L. (1999) Nat Genet 23, 281-5.
  2. North, B.J. et al. (2003) Mol Cell 11, 437-44.
  3. Vaquero, A. et al. (2006) Genes Dev 20, 1256-61.
  4. Scher, M.B. et al. (2007) Genes Dev 21, 920-8.
  5. Schwer, B. et al. (2002) J Cell Biol 158, 647-57.
  6. Onyango, P. et al. (2002) Proc Natl Acad Sci U S A 99, 13653-8.
  7. Schwer, B. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103, 10224-9.
  8. Newman, J.C. et al. (2012) J Biol Chem 287, 42436-43.
  9. He, W. et al. (2012) Trends Endocrinol Metab 23, 467-76.
  10. Mostoslavsky, R. et al. (2006) Cell 124, 315-29.
  11. Liszt, G. et al. (2005) J Biol Chem 280, 21313-20.
  12. Michishita, E. et al. (2005) Mol Biol Cell 16, 4623-35.
  13. Voelter-Mahlknecht, S. et al. (2006) Int J Oncol 28, 899-908.
  14. Barber, M.F. et al. (2012) Nature 487, 114-8.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #9787

    Sirtuin Antibody Sampler Kit

    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 SirT2 (D4O5O) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody #2314（上图）或 SirT1 Antibody #2310（下图），对未经处理或已经 λ 磷酸酶处理的 293 细胞裂解物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 SirT7 (D3K5A) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 SirT3 (D22A3) Rabbit mAb（上图）和 AIF (D39D2) XP® Rabbit mAb #5318（下图）对 SirT3 野生型 (WT) 小鼠肝细胞（泳道 1）和敲除型 (KO) 小鼠肝细胞（泳道 2）的线粒体提取物以及大鼠肝细胞（泳道 3）和人肾细胞（泳道 4）的完整细胞提取物进行蛋白印迹分析。SirT3 敲除型小鼠肝细胞中没有信号，这证实了抗体对 SirT3 的特异性
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 SirT5 (D8C3) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对表达非靶向 shRNA (293 shNT) 或 shRNA 靶向 SirT5 (293 shSirT5) 的 293 细胞以及 HCT 116、Raw 264.7 和 H-4-II-E 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。293 shNT 和 293 shSirT5 细胞由密歇根大学的 David Lombard 惠赠。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 SirT1 (D1D7) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对野生型小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)（泳道 1）或 SirT1 敲除型小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF)（泳道 2）进行蛋白印迹分析。SirT1 敲除型小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 中没有信号，这证实了抗体对 SirT1 的特异性。野生型和敲除型 MEF 由哈佛大学医学院的 Wenyi Wei 惠赠。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457​（下图），对表达非靶向 shRNA (shNT) 或 shSirT6 的 HCT 116 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 SirT2 (D4O5O) Rabbit mAb（上图）或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图），对 SirT2 野生型 (WT) 和敲除型 (KO) 小鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。SirT2 WT 和 KO 小鼠脑细胞提取物由塔夫斯大学医学院的 Gizem Donmez 博士惠赠。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody（绿色）对未经处理（左图）或已经磷酸酶（右图）处理的 HT-1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝已用 DY-554 phalloidin（红色）标记。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 SirT3 (D22A3) Rabbit mAb #5490（上图）或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对对照 HeLa 细胞（泳道 1）或 SirT3 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。SirT3 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对 SirT3 的特异性。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 SirT1 (D1D7) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对 SirT6 野生型 (WT) 和敲除型 (KO) 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 的提取物进行蛋白质印迹分析。SirT6 WT 和 KO MEF 由密歇根大学的 David Lombard 博士惠赠。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    以非特异性阴性对照抗体（红色）作为对照，使用 Phospho-SirT1 (Ser47) Antibody 对未经处理（绿色）或已经 λ 磷酸酶（蓝色）处理的 K-562 细胞进行流式细胞分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 3）或 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb（泳道 2），对 HCT 116 细胞提取物 SirT6 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Sirtuin Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 SirT6 (D8D12) Rabbit mAb（绿色）对表达非靶向 shRNA (shNT)（左图）或 shSirT6（右图）的 HCT 116 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。
    图像库
    更多了解我们如何获得图像
    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。