Revision 1

#25501Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 61702 20 µl 300 kDa Rabbit IgG
SET1B (D1U5D) Rabbit mAb 44922 20 µl 320 kDa Rabbit IgG
MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) 14689 20 µl 300 kDa Rabbit IgG
MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) 14197 20 µl 180 kDa Rabbit IgG
MLL2/KMT2B (D6X2E) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) 63735 20 µl 80 kDa Rabbit IgG
WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 13105 20 µl 37 kDa Rabbit IgG
WDR82 (D2I3B) Rabbit mAb 99715 20 µl 30 kDa Rabbit IgG
Menin (D45B1) XP® Rabbit mAb 6891 20 µl 68 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting SET1/COMPASS proteins using control antibodies against SET1A, SET1B, MLL1, MLL2, WDR5, WDR82, and Menin. This kit contains enough primary antibodies to perform at least two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The Set1 histone methyltransferase protein was first identified in yeast as part of the Set1/COMPASS histone methyltransferase complex, which methylates histone H3 on lysine 4 and functions as a transcriptional co-activator (1). While yeast contain only one known Set1 protein, mammals contain six Set1-related proteins: SET1A, SET1B, MLL1, MLL2, MLL3 and MLL4, all of which methylate histone H3 on lysine 4 (2,3). These Set1-related proteins are each found in distinct protein complexes, all of which share the common core structural subunits WDR5, RBBP5 and ASH2L (2-6). WDR82 is a core subunit specific to SET1A and SET1B complexes, while Menin is a core subunit specific to the MLL complexes (4,5,7).

Like yeast Set1, all six Set1-related mammalian proteins methylate histone H3 on lysine 4 (2-6). SET1A, SET1B, MLL1 and MLL2 mediate di- and tri-methylation of histone H3 Lys4 at gene promoters to facilitate transcription activation. MLL3 and MLL4 function primarily to mono-methylate histone H3 Lys4 at gene enhancers. MLL1 and MLL2 function as master regulators of both embryogenesis and hematopoiesis, and are required for proper expression of Hox genes (8-10). MLL1 is a large approximately 4000 amino acid protein that is cleaved by the Taspase 1 threonine endopeptidase to form N-terminal (MLL1-N) and C-terminal MLL1 (MLL1-C) fragments, both of which are subunits of the functional MLL1/COMPASS complex (11,12). MLL1 translocations are found in a large number of hematological malignancies, suggesting that Set1 histone methyltransferase complexes play a critical role in leukemogenesis (6). Like MLL1, MLL2 is also a large, approximately 2700 amino acid protein that is cleaved by the Taspase 1 threonine endopeptidase to form N-terminal (MLL2-N) and C-terminal (MLL2-C) fragments, both of which are subunits of the functional MLL2/COMPASS complex. MLL2 has also been implicated as a modulator of hematological malignancies (13). MLL3 and MLL4 proteins are not cleaved by Taspase 1.

  1. Miller, T. et al. (2001) Proc Natl Acad Sci U S A 98, 12902-7.
  2. Shilatifard, A. (2008) Curr Opin Cell Biol 20, 341-8.
  3. Tenney, K. and Shilatifard, A. (2005) J Cell Biochem 95, 429-36.
  4. Lee, J.H. and Skalnik, D.G. (2005) J Biol Chem 280, 41725-31.
  5. Lee, J.H. et al. (2007) J Biol Chem 282, 13419-28.
  6. Hughes, C.M. et al. (2004) Mol Cell 13, 587-97.
  7. Yokoyama, A. et al. (2004) Mol Cell Biol 24, 5639-49.
  8. Eissenberg, J.C. and Shilatifard, A. (2010) Dev Biol 339, 240-9.
  9. Smith, E. et al. (2011) Genes Dev 25, 661-72.
  10. Denissov, S. et al. (2014) Development 141, 526-37.
  11. Takeda, S. et al. (2006) Genes Dev 20, 2397-409.
  12. Yokoyama, A. et al. (2002) Blood 100, 3710-8.
  13. Chen, Y. et al. (2017) Cancer Cell 31, 755-770.e6.

Background References

    Trademarks and Patents

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #25501

    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit

    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。该图显示了 HoxA 基因内的结合。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) （上）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下），对 MLL1 野生型 (WT) 和敲除 (KO) 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 的提取物进行蛋白质印迹分析。 MLL1 WT 和 KO MEF 由 Shilatifard of Northwestern University 的 Ali Shilatifard 博士惠赠。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，对 NCCIT 细胞和 MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在已知 MLL1 靶标基因 ELOC 内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    CUT&Tag was performed with NCCIT cells and MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen), using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figure shows binding across ELOC gene.
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 SET1B (D1U5D) Rabbit mAb 对 293T, F9 和 COS-7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 对 293T 和 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 MLL2/KMT2B (D6X2E) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen)（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预期，HCT 116 细胞的 MLL2 表达呈阴性。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Menin (D45B1) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 WDR82 (D2I3B) Rabbit mAb 对 HCT 116、NIH/3T3 和 COS-7 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 NCCIT 细胞的交联染色质和 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 NANOG 内结合，NANOG 是一种已知的 WDR5 靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。这些图显示了 HOXA 基因（上图）和 HOXD 基因（下图）内的结合。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen)，对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，对 NCCIT 细胞和 MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 8（上图）内的结合，包括 MLL1 的已知靶标基因 ELOC（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    CUT&Tag was performed with NCCIT cells and MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen), using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figures show binding across chromosome 8 (upper), including ELOC gene (lower).
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物 SET1B 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 SET1B (D1U5D) Rabbit mAb。使用 SET1B (D1U5D) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    对 293T 细胞提取物 SET1A 进行免疫沉淀。泳道 1 为10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb。使用 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    对来自 NCCIT 细胞提取物的 MLL2/KMT2B 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 MLL2/KMT2B (D6X2E) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen)。使用 MLL2/KMT2B (D6X2E) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen) 进行蛋白质印迹分析。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Menin (D45B1) XP® Rabbit mAb（绿色）对 COS-7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 NCCIT 细胞的交联染色质和 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 12（上图）内的结合，包括 WDR5 的已知靶基因 NANOG（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用人 TAF6L 启动子引物和人 ZNF644 启动子引物，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 MLL (D6G8N) Rabbit mAb（羧基抗原）（绿色），对 MEF 野生型（左，阳性）和 MEF MLL (-/-) （右，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。MLL1 WT 和 KO MEF 由 Shilatifard of Northwestern University 的 Ali Shilatifard 博士惠赠。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，对€‚ NCCIT 细胞和 MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用 human RTN4 promoter、human ELOC promoter 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 HeLa 细胞的交联染色质和 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。本图显示在 GAPDH （SET1A 的一个已知靶标基因）内的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。欲知其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 MLL2/KMT2B (D6X2E) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen)（绿色）对 A549 细胞（左图，阳性）和 HCT 116细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 NCCIT 细胞中提取的交联染色质，在加入 WDR5 (D9E1I) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 human nanog promoter primers、SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 HeLa 细胞的交联染色质和 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 12（上图）内的结合，包括 SET1A 的已知靶标基因 GAPDH（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 HeLa 细胞中提取的交联染色质，在加入 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human β-Actin Promoter Primers #13653、SimpleChIP® Human GAPDH Promoter Primers #4471 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 ，以 HeLa 细胞和 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示结合作用遍及 PRKAA1 基因， SET1A 的已知靶标基因（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 ，以 HeLa 细胞和 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 5（上图）内的结合，包括 SET1A 的已知靶标基因 PRKAA1（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    SET1/COMPASS Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，以 HeLa 细胞和 SET1A (D3V9S) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用人 PRKAA1 启动子引物、人 KANSL1L 启动子引物和人 PAD14 启动子引物，通过实时 PCR 对富集的 DNA 定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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