Revision 1

#56062Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
p16 INK4A (D3W8G) Rabbit mAb 92803 20 µl 16 kDa Rabbit IgG
p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb 2947 20 µl 21 kDa Rabbit IgG
Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 9718 20 µl 15 kDa Rabbit IgG
Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb 13435 20 µl 68, 45 kDa Rabbit IgG
HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb 6893 20 µl 29 kDa Rabbit IgG
IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb 12153 20 µl 21-28 kDa Rabbit IgG
TNF-α (D5G9) Rabbit mAb 6945 20 µl 18, 25 kDa Rabbit IgG
MMP-3 (D7F5B) Rabbit mAb 14351 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Senescence Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting multiple markers of cellular senescence. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Background

Senescence is characterized by stable stress-induced proliferative arrest and resistance to mitogenic stimuli, as well as the secretion of proteins such as cytokines, growth factors and proteases. These secreted proteins comprise the senescence-associated secretory phenotype (SASP). Senescent cells are thought to accumulate as an organism ages, and contribute to age-related diseases, including cancer, through promotion of inflammation and disruption of normal cellular function (1,2).
Because there is no single biomarker that can be used to definitively identify senescent cells, researchers must rely on a collection of biomarkers commonly associated with senescence. The Senescence Marker Antibody Sampler Kit provides a collection of antibodies to commonly used biomarkers of senescence-associated cell cycle arrest (p16 INK4A, p21 Waf1/Cip1), senescence-associated DNA damage (gamma-Histone H2A.X), and the SASP (HMGB1, IL-6, TNF-alpha, MMP3). The kit also includes an antibody to Lamin B1, which is frequently reduced in senescent cells.

  1. Tchkonia, T. et al. (2013) J Clin Invest 123, 966-72.
  2. Sun, Y. et al. (2018) Trends Mol Med 24, 871-885.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 5,675,063.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #56062

    Senescence Marker Antibody Sampler Kit

    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb #2947 对 MCF-7 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb 对 1 ng 重组 Human Interleukin-6 (hIL-6)) #8904 进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb #13435（上图）和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 HeLa 细胞（泳道 1）或 LMNB1 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白印迹分析。LMNB1 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对 LMNB1 的特异性。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 MMP-3 (D7F5B) 兔单抗对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对对照的 HeLa 细胞（泳道 1）或 p21 Waf1/Cip1 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）进行蛋白印迹分析。p21 Waf1/Cip1 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对 p21 Waf1/Cip1 的特异性。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 TNF-α (D5G9) Rabbit mAb，对 THP-1 细胞培养基的提取物进行蛋白质印迹分析。该细胞经 TPA #4174（80 nM；过夜）分化，使用或不使用 LPS (1 μg/ml；过夜)处理。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 p16 INK4A (D3W8G) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 （下图）对 HeLa 和 HUVEC 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb（上）或 Histone H2A.X Antibody #2595（下）对未经处理的或经紫外线处理的 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢透明细胞癌组织进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb 或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对使用 TPA #4174 (80 nM，过夜）分化的、未经处理 (-) 或用 LPS 处理（100 ng/ml，6 小时；+）并用 Brefeldin A #9972（300 ng/mL，刺激 3 小时；+）处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb 对不同细胞系和组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb 对未经处理 (-) 或经 Lipopolysaccharides (LPS) #14011（50 ng/ml，4 小时；+）处理后再用 Nigericin（15 μM，45 分钟；+）处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (mBMDM) 的培养基提取物进行蛋白印迹法分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 TNF-α (D5G9) Rabbit mAb，对 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。该细胞经 TPA #4174（80 nM；过夜）分化，使用或不使用 LPS (1 μg/ml；不同时间长度) 处理。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    对 HeLa 细胞的 p16 INK4A 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 p16 INK4A (D3W8G) Rabbit mAb。使用 p16 INK4A (D3W8G) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb （泳道 3），对来自 NCI-H460 细胞提取物的 IL-6 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 IL-6 (D3K2N) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Lamin B1 (D9V6H) Rabbit mAb 对未处理 (-) 或经过 Staurosporine #9953 (1 μM, 3 hr；+) 处理的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb #2947 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 ，对 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® p21 Waf1/Cip1 siRNA II (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb 确认 p21 Waf1/Cip1 表达的沉默，而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 用作 p21 Waf1/Cip1 siRNA 的上样和特异性对照。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 TNF-α (D5G9) Rabbit mAb (左) 或 TNF-α Antibody #3707 (右)，对重组人 TNF-α #8902 进行蛋白质印迹分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析，表明其定位于胞核内。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb 对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 的 p21 进行免疫沉淀。使用相同的抗体进行蛋白质印迹检测。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人类肺癌进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人体前列腺癌进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对未经处理的（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb，对 SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568（左）或 SignalSilence® p21 Waf1/Cip1 siRNA II #6558（右）转染的石蜡包埋 HeLa 细胞进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb（红色）和 Phospho-Histone H3 (Ser10) (6G3) Mouse mAb #9706（绿色）对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb 对未经处理的（左）或经紫外线处理（右）的石蜡包埋的 HT-29 细胞进行免疫组织化学分析。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb（绿色）对未经处理的（左）或经紫外线处理（右）的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（左图）作为对照，使用 p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb（右图）和 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087 对 Daudi 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Senescence Marker Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Phospho-H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® isotype control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或已经过紫外线（100 mJ，恢复 2 小时；绿色）处理的 HeLa 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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