Revision 1

#9926Store at -20C

1 个试剂盒

(3 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 4695 20 µl 42, 44 kDa Rabbit IgG
SAPK/JNK Antibody 9252 20 µl 46, 54 kDa Rabbit 
p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb 8690 20 µl 40 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The MAPK Family Antibody Sampler Kit provides an economical means of evaluating total levels of p38, p44/42, and SAPK/JNK mitogen-activated protein kinases. The kit contains enough primary and secondary antibody to perform two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

p44/42 MAPK (Erk1/2), SAPK/JNK, and p38 MAPK function in protein kinase cascades that play a critical role in the regulation of cell growth, differentiation, and control of cellular responses to cytokines and stress. p44/42 MAPK is activated by growth and neurotrophic factors. Activation occurs through phosphorylation of threonine and tyrosine residues (Thr202 and Tyr204 in human Erk1) at the sequence T*EY* by a single upstream MAP kinase kinase (MEK). SAPK/JNK and p38 MAPK are activated by inflammatory cytokines and by a wide variety of cellular stresses. Activation of SAPK/JNK occurs via phosphorylation at Thr183 and Tyr185 by the dual specificity enzyme SEK/MKK4. Both MKK3 and SEK phosphorylate p38 MAPK on tyrosine and threonine at the sequence T*GY* to activate p38 MAP kinase (1-5).

  1. Lewis, T. S. et al. (1998) Adv. Cancer Res. 74, 49-139.
  2. Garrington, T.P. and Johnson, G.L. (1999) Curr. Opin. Cell. Biol. 11, 211-218.
  3. Schaeffer, H.J. and Weber, M.J. (1999) Mol. Cell. Biol. 19, 2435-2444.
  4. Whitmarsh, A.J. and Davis, R.J. (1998) Trends Biochem. Sci. 23, 481-485.
  5. Cobb, M.H. (1999) Prog. Biophys. Mol. Biol. 71, 479-500.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    Revision 1
    #9926

    MAPK Family Antibody Sampler Kit

    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对 Jurkat 细胞提取物进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% Input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb。使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb (HRP Conjugate) #93702 用作二抗。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 SAPK/JNK Antibody #9252 对 293 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道视图(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的两个靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Western blot analysis of extracts from various cell lines using p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb.
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-SAPK/JNK Antibody #9251(上)或 SAPK/JNK Antibody(下)对未经处理或经紫外线处理 (40 J/m2) 的 293 和 SK-N-MC 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb #4695 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® p44/42 MAPK (Erk1/2) siRNA (+) 转染的 Hek 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 可确认 p44/42 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作 p44/42 MAPK (Erk1/2) siRNA 上样和特异性的对照。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析,显示其定位于细胞质和细胞核。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    在对照肽(左)或 #1240 p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)(右)存在的情况下,使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb(绿色)对经 U0126 (MEK1/2 Inhibitor) #9903(左)或 PDGF(右)处理的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb(绿色)对未经(左)或经紫外线处理(100 mJ/cm2,30 分钟恢复;右)的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    MAPK Family Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb(实线)对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。