Revision 1

#98322Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Bax (D2E11) Rabbit mAb 5023 20 µl 20 kDa Rabbit IgG
Bak (D4E4) Rabbit mAb 12105 20 µl 25 kDa Rabbit IgG
Bok (D7V2N) Rabbit mAb 86875 20 µl 22 kDa Rabbit IgG
Bim (C34C5) Rabbit mAb 2933 20 µl 12, 15, 23 kDa Rabbit IgG
Bad (D24A9) Rabbit mAb 9239 20 µl 23 kDa Rabbit IgG
BID Antibody 2002 20 µl 15, 22 kDa Rabbit 
Puma (D30C10) Rabbit mAb 12450 20 µl 23 kDa Rabbit IgG
Noxa (D8L7U) Rabbit mAb 14766 20 µl 10 kDa Rabbit IgG
Bik Antibody 4592 20 µl 20 kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II provides an economical means to examine several members of the Bcl-2 family. The kit contains enough primary antibody to perform two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

The Bcl-2 family consists of a number of evolutionarily conserved proteins containing Bcl-2 homology domains (BH) that regulate apoptosis through control of mitochondrial membrane permeability and release of cytochrome c (1-3). Four BH domains have been identified (BH1-4) that mediate protein interactions. The family can be separated into three groups based upon function and sequence homology: pro-survival members include Bcl-2, Bcl-xL, Mcl-1, A1 and Bcl-w; pro-apoptotic proteins include Bax, Bak and Bok; and "BH3 only" proteins Bad, Bik, Bid, Puma, Bim, Bmf, Noxa and Hrk. Interactions between death-promoting and death-suppressing Bcl-2 family members has led to a rheostat model in which the ratio of pro-apoptotic and anti-apoptotic proteins controls cell fate (4). Thus, pro-survival members exert their behavior by binding to and antagonizing death-promoting members. In general, the "BH3-only members" can bind to and antagonize the pro-survival proteins leading to increased apoptosis (5). While some redundancy of this system likely exists, tissue specificity, transcriptional and post-translational regulation of many of these family members can account for distinct physiological roles.

  1. Cory, S. et al. (2003) Oncogene 22, 8590-607.
  2. Antonsson, B. and Martinou, J.C. (2000) Exp Cell Res 256, 50-7.
  3. Sharpe, J.C. et al. (2004) Biochim Biophys Acta 1644, 107-13.
  4. Korsmeyer, S.J. et al. (1993) Semin Cancer Biol 4, 327-32.
  5. Bouillet, P. and Strasser, A. (2002) J Cell Sci 115, 1567-74.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #98322

    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II

    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 1 Expand Image
    使用 BID Antibody #2002 对经过细胞色素 C（250 μM，45 分钟）处理的 Jurkat 细胞裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道视图（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的两个靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 2 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb（泳道 1）或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control（泳道 2）对 RL 细胞裂解物进行免疫沉淀法分析。使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。使用 Protein A (HRP Conjugate) #12291 进行二次检测。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 3 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb #2933 对 Raji 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道视图（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的三个靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 4 Expand Image
    使用 Bax (D2E11) Rabbit mAb #5023 对 HepG2 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 5 Expand Image
    使用 Bad (D24A9) Rabbit mAb #9239 对 OVCAR8 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 6 Expand Image
    使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 7 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb（实线）对 OVCAR8 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 8 Expand Image
    使用 Puma (D30C10) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对未经处理 (-) 或已经 Doxorubicin #5927（500 nM，过夜；+）处理的 A549 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 9 Expand Image
    使用 Noxa (D8L7U) Rabbit mAb 对 KARPAS-299、RL 和 L-540 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。细胞系来源：剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 10 Expand Image
    使用 BID Antibody 对未经处理或经过 etoposide (25 µM) 处理的 Jurkat 细胞提取物以及未经处理或经过 okadaic acid (1 µM) 处理的 RS4;11 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 11 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对 Raji、A20 和 RL 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 12 Expand Image
    Flow cytometric analysis of fixed/permeabilized JeKo-1 cells (blue, negative) and Raji cells (green, positive) using Bim (C34C5) Rabbit mAb (solid lines) or concentration-matched Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (dashed lines). Anti-rabbit IgG F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 13 Expand Image
    使用 Bax (D2E11) Rabbit mAb #2（上图）或 β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970（下图）对对照 HeLa 细胞 (lane 1) 或 Bax 敲除 HeLa 细胞 (lane 5023) 的提取物进行蛋白印迹分析。Bax 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 Bax 的特异性。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 14 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 15 Expand Image
    使用 Bok (D7V2N) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 16 Expand Image
    使用 Bad (D24A9) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 17 Expand Image
    使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 18 Expand Image
    使用 Puma (D30C10) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 19 Expand Image
    使用 Noxa (D8L7U) Rabbit mAb （上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对未经处理 (-) 或已经 TPA #4174（10 ng/ml，3 小时；+）处理的血清饥饿 Jurkat 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 20 Expand Image
    使用Bim (C34C5) Rabbit mAb #2933 and α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125，对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-)， 或 SignalSilence® Bim siRNA I #6461，或SignalSilence® Bim siRNA II (+), 转染的HeLa细胞提取物进行蛋白质印迹分析Bim (C34C5) Rabbit mAb 确认 Bim 表达的沉默，而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样和Bim siRNA异性对照。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 21 Expand Image
    使用 Bik Antibody 对 Raji 和 Ramos 细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 22 Expand Image
    使用 Bax (D2E11) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。Brimmel 等人证实，Jurkat 细胞缺少 Bax 蛋白表达 (10)。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 23 Expand Image
    使用 Bok (D7V2N) Rabbit mAb（上）或 Myc- Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（下），对转染空载 （-）或转染带有 Myc/DDK 标签的全长人 Bok（hBok-Myc/DDK; +）的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 24 Expand Image
    使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 25 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Puma (D30C10) Rabbit mAb（泳道 3），对 RL 细胞提取物 Puma 进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Puma (D30C10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 26 Expand Image
    使用 Noxa (D8L7U) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染表达全长人 Noxa 蛋白 (hNoxa; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 27 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 28 Expand Image
    在对照肽（上）或抗原特异性肽（下）存在的情况下，使用 Bax (D2E11) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 29 Expand Image
    使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺细胞进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 30 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Noxa (D8L7U) Rabbit mAb（泳道 3），对 KARPAS-299 细胞的 Noxa 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Noxa (D8L7U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。细胞系来源：剑桥大学的 Abraham Karpas 博士。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 31 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 在 Leica® BOND™ Rx 上对石蜡包埋的人非小细胞肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 32 Expand Image
    对 HepG2 细胞的 Bax 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 进行沉淀，泳道 3 为 Bax (D2E11) Rabbit mAb #5023。使用 Bax (2D2) Mouse mAb #89477 进行蛋白质印迹法分析，以防止重链和轻链 IgG 掩蔽。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 33 Expand Image
    使用 Bak (D4E4) Rabbit mAb（绿色；左），对显示与用 MitoTracker® Red CMXRos（红色；中间）标记的线粒体共定位的 OVCAR8 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 34 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 35 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 36 Expand Image
    在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 37 Expand Image
    使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 4T1 同源基因肿瘤进行免疫组织化学分析。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 38 Expand Image
    使用 Bim Antibody（绿色）对 MCF-7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析，显示与用 MitoTracker® Red CMXRos（红色）标记的线粒体共定位。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Pro-Apoptosis Bcl-2 Family Antibody Sampler Kit II: Image 39 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Bim (C34C5) Rabbit mAb（实线）对 Raji 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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