Revision 4

#3860Store at -20C

1 个试剂盒

(5 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-PLCγ2 (Tyr1217) Antibody 3871 20 µl 150 kDa Rabbit 
Phospho-PLCγ2 (Tyr759) (E9E9Y) Rabbit mAb 50535 20 µl 150 kDa Rabbit IgG
PLCγ2 (E5U4T) Rabbit mAb 55512 20 µl 150 kDa Rabbit IgG
Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 14008 20 µl 155 kDa Rabbit IgG
PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 5690 20 µl 150 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

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Description

PLCγ Antibody Sampler Kit provides an economical means of analyzing phospho and total PLCγ levels. PLCγ Antibody Sampler Kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two western blot experiments with each antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Phosphoinositide-specific phospholipase C (PLC) plays a significant role in transmembrane signaling. In response to extracellular stimuli, such as hormones, growth factors, and neurotransmitters, PLC hydrolyzes phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) to generate two secondary messengers: inositol 1,4,5-triphosphate (IP3) and diacylglycerol (DAG) (1). At least four families of PLCs have been identified: PLCβ, PLCγ, PLCδ, and PLCε. Phosphorylation is one of the key mechanisms that regulate the activity of PLC. PLCγ is activated by both receptor and non-receptor tyrosine kinases (2). PLCγ forms a complex with EGF and PDGF receptors, which leads to the phosphorylation of PLCγ at Tyr771, 783, and 1248 (3). Phosphorylation by Syk at Tyr783 activates the enzymatic activity of PLCγ1 (4). PLCγ2 is engaged in antigen-dependent signaling in B cells and collagen-dependent signaling in platelets. Phosphorylation by Btk or Lck at Tyr753, 759, 1197, and 1217 is correlated with PLCγ2 activity (5,6).

  1. Singer, W.D. et al. (1997) Annu Rev Biochem 66, 475-509.
  2. Margolis, B. et al. (1989) Cell 57, 1101-7.
  3. Kim, H.K. et al. (1991) Cell 65, 435-41.
  4. Wang, Z. et al. (1998) Mol Cell Biol 18, 590-7.
  5. Watanabe, D. et al. (2001) J Biol Chem 276, 38595-601.
  6. Ozdener, F. et al. (2002) Mol Pharmacol 62, 672-9.

Background References

    Trademarks and Patents

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 4
    #3860

    PLCγ Antibody Sampler Kit

    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from serum-starved A431 cells treated with hEGF (100 ng/mL, 5 min.) using Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb #14008. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.75 mg/ml) from Ramos + IgM cells using Phospho-PLCγ2 (Tyr759) (E9E9Y) Rabbit mAb #50535. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230kDa.
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (1 mg/ml) from ZR-75-1 cells using PLCγ2 (E5U4T) Rabbit mAb #55512. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 66-440kDa.
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物中的 PLCγ1 蛋白进行免疫沉淀法分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb，泳道 3 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900。使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (1mg/mL) from 3T3 cells using PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb #5690. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the Jess™ Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the12-230 kDa separation module.
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下），对未经处理 (-) 或经 hPDGF-BB #8912 刺激（5分钟；+）的 NIH/3T3 细胞、未经处理 (-) 或经 hEGF #8916 刺激（5 分钟；+）的 A-431 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ2 (Tyr1217) Antibody（上图）或 PLCγ2 Antibody #3872（下图），对未经处理或已经抗人 IgM 处理的 Ramos 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ2 (Tyr759) (E9E9Y) Rabbit mAb（上图）、PLCγ2 (E5U4T) Rabbit mAb #55512（中间）或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对未处理的 (-) 或已经抗人 IgM 处理（12 μg/ml，10 分钟；+）的 Daudi 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 PLCγ2 (E5U4T) 兔单克隆抗体（上图）或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体#8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（泳道 3），对经 hEGF #8916 刺激的 A-431 细胞提取物 phospho-PLCγ1 (Tyr783) 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    对 HCT 116 细胞提取物 PLCγ2 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入，泳道 2 为兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900，泳道 3 为 PLCγ2 (E5U4T) 兔单克隆抗体。使用 PLCγ2 (E5U4T) 兔单克隆抗体进行蛋白印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对转染空载或转染 SignalSilence™ PLCγ1 siRNA I #6293 或 siRNA II #6254 达到 48 小时的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 PLCγ2 (E5U4T) 兔单克隆抗体（绿色）对 HCT 116 细胞（左图，阳性）和 22Rv1 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对未经处理（蓝色）或已经 mPDGFbb（200ng/ml，15 分钟；绿色）处理的 NIH/3T3 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胰腺进行免疫组织化学分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脾脏进行免疫组织化学分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠睾丸进行免疫组织化学分析。
    PLCγ Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 PLCγ1 (D9H10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    图像库
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