Revision 2

#52420Store at -20C

1 个试剂盒

(7 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb 13008 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb 13619 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 59971 20 µl 55 kDa Rabbit IgG
YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb 8418 20 µl 55, 78 kDa Rabbit IgG
YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 14074 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
TAZ (D3I6D) Rabbit mAb 70148 20 µl 50 kDa Rabbit IgG
Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) Rabbit mAb 53749 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit uses phospho-specific and control antibodies to provide an economical means of detecting the phosphorylation of YAP and TAZ proteins at critical residues that are reported to regulate YAP and TAZ protein stability. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

YAP and TAZ (WWTR1) are transcriptional co-activators that play a central role in the Hippo Signaling pathway that regulates cell, tissue and organ growth. YAP and TAZ are structurally and functionally similar, but exhibit differential patterns of expression among cells and tissues that suggest partially non-redundant functions (1). YAP and TAZ are dynamically regulated in response to internal and external cellular signals. Under growth conditions, YAP and TAZ are translocated to the nucleus, where they interact with transcription factors (e.g., TEA domain proteins) that regulate the transcription of genes that control proliferation and cell survival (2). The subcellular localization of YAP and TAZ is dynamically regulated by a kinase cascade that regulates the phosphorylation status of key residues within YAP and TAZ. Phosphorylation of YAP and TAZ (e.g., Ser109, Ser127, Ser397 in YAP; Ser89 in TAZ) results in their cytoplasmic translocation, sequestration by 14-3-3 proteins, and recruitment of the β-TrCP (SCF) ubiquitin ligase complex (3,4). This complex ubiquitinates YAP and TAZ, triggering their proteolytic degradation in the proteasome, thereby altering the transcription of genes that control proliferation and cell survival (3-5).

  1. Piccolo, S. et al. (2014) Physiol Rev 94, 1287-312.
  2. Holden, J.K. and Cunningham, C.N. (2018) Cancers (Basel) 10, .
  3. Lei, Q.Y. et al. (2008) Mol Cell Biol 28, 2426-36.
  4. Zhao, B. et al. (2010) Genes Dev 24, 72-85.
  5. Cordenonsi, M. et al. (2011) Cell 147, 759-72.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    Revision 2
    #52420

    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit

    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对 RL 细胞(蓝色)和 A-204 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb #14074 对 MCF-7 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse small intestine labeled with YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (left, green) and co-labeled with ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (right, blue).
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse kidney labeled with YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (left, green) and co-labeled with ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (right, blue).
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Confocal immunofluorescent analysis of fixed frozen mouse cerebellum labeled with YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb (left, green) and co-labeled with ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961 (right, blue).
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物的 TAZ 蛋白进行的免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 TAZ (D3I6D) Rabbit mAb。使用 TAZ (D3I6D) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 用于检测,以避免与 IgG 交叉反应。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb #13008(上图)和 GAPDH (D6H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对未处理 (-) 或经 λ-磷酸酶处理 (+) 的 Hep G2 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 蛋白同工型 1 Ser397 对应于 YAP 同工型 2 的 Ser381,如 Zhao 等人所报道 (2010) Genes Dev 24, 72-85 (9)
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(上图)或 β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970(下图)对对照的 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) Rabbit mAb #53749(上图)和 GAPDH (D6H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb(上图)、TAZ (D3I6D) Rabbit MAb #70148(中间)和 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对未经处理 (-) 或已经牛小肠磷酸酶 (+) 处理的 PANC-1 和 A-204 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。星号 (*) 表示 TAZ (Ser89) 和 YAP (Ser127) 周围区域的序列相似性导致磷酸化 YAP 的检测较微弱。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 TAZ (D3I6D) Rabbit mAb(上图)和 GAPDH (D16H11) XP® #5174(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预期一样,Raji 细胞中 TAZ 呈阴性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对未处理 (-) 或经 λ-磷酸酶处理 (+) 的 PANC-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8547(下),对经溶媒处理 (-) 或经肾上腺素(10 μM,60 分钟;+)或 Forskolin #3828(10 μm,60 分钟;+)处理的 MDA-MB-231 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 蛋白同工型 1 Ser397 对应于 YAP 同工型 2 的 Ser381,如 Zhao, B. 等人所报道 (2010) Genes Dev 24, 72-85 (9)
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。正如预计的一样,RL 细胞的 YAP 蛋白表达呈阴性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) 兔单克隆抗体(上图)、YAP (D8H1X) XP® 兔单克隆抗体 #14074(中间)和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对未经 (-) 或已经牛小肠磷酸酶 (CIP) 和 λ-磷酸酶 (+) 处理的 PANC-1 细胞和 HeLa 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    对源自 A-204 细胞提取物的 Phospho-TAZ (Ser89) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb。使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。星号 (*) 表示 TAZ (Ser89) 和 YAP (Ser127) 周围区域的序列相似性导致磷酸化 YAP 的检测较微弱。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 NCI-H2052 细胞的交联染色质和 TAZ (D3I6D) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 SMYD3 内结合,SMYD3 是一种已知的 TAZ 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb #8418(上图)和 GAPDH (D6H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对经溶媒处理 (-) 或用 Forskolin #3828(10 μM,60 分钟;+)或肾上腺素(10 μM,60 分钟;+)处理的 MDA-MB-231 细胞进行蛋白质印迹分析。注意,在经毛喉素或肾上腺素处理后,诱导 YAP (Ser127) 磷酸化与 Xu 等人报道的结果一致。(2012) [9]。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(泳道 3)对 A-204 细胞提取物 YAP 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 用作二抗。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) 兔单克隆抗体(上图)和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。RL 细胞的 YAP 表达呈阴性,从而证实了该抗体的特异性。正如已发表的基因表达数据库中预测以及使用其他 YAP 抗体所确认的,在 RL 提取物中无法检测到 YAP 表达。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人尿路上皮癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 NCI-H2052 细胞的交联染色质和 TAZ (D3I6D) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 1(上图)内的结合,包括 TAZ 的已知靶基因 SMYD3(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb,对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    显示不同的人 YAP 同工型中 Ser397 周围的氨基酸序列注释的示意图。星号 (*) 表示如 Zhao 等人所述的磷酸化位点的注释。2010 [9]。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    对 PANC-1 细胞提取物磷酸化 YAP (Ser109) 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 敲入,泳道 2 为兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900,泳道 3 为 Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) 兔单克隆抗体。使用 Phospho-YAP (Ser109) 抗体 #46931 进行蛋白印迹分析。小鼠抗兔 IgG (构象特异) (L27A9) 单克隆抗体 (HRP 偶联物) #5127 用于检测,以免与 IgG 发生交叉反应。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 SK-MEL-28 细胞沉淀物(左图,阳性)或 RL 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 NCI-H2052 细胞的交联染色质与 TAZ (D3I6D) Rabbit mA 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human CTGF Promoter Primers #14927、Human SMYD3 intron 2 primers 与 SimpleChIP® Human CTGF Upstream Primers #14928,通过实时 PCR对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜样腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb.对未经(左图)或经 λ 磷酸酶(右图)处理的石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb ,对石蜡包埋的人结肠腺癌(对照(左)或 λ 磷酸酶处理(右))进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物 A-204(左图)和 RL(右图)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人类非小细胞肺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢浆液性癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb,对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(顶部图)或 TAZ (E9J5A) XP® Rabbit mAb #72804(底部图)对石蜡包埋的人非小细胞肺癌(左图)、结肠癌病例 1(中图)或结肠癌病例 2(右图)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人良性前列腺增生细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 Phospho-TAZ (Ser89) (E1X9C) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢透明细胞癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(左图)或 YAP Antibody(右图)对石蜡包埋的小鼠小肠进行免疫组织化学分析。这两种抗体可检测 YAP 蛋白上独特的非重叠表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(顶部图)or TAZ (E9J5A) XP® Rabbit mAb #72804(底部图)对石蜡包埋的未转染(左图,YAP/TAZ 低)或 YAP 转染(中图)或 TAZ 转染(右图)的 BEN 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的野生型 293T 细胞沉淀物(左图,阳性)或敲除 YAP/TAZ 的 293T 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 51 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 PANC-1(左图)和 RL(右图)细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 52 Expand Image
    使用 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb(绿色)对低汇合度 MCF 10A 细胞(左图)、高汇合度 MCF 10A 细胞(中图)和 YAP 呈阴性的 RL 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。下图中的蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。在低汇合度(增殖)细胞中观察到越来越多的 YAP 蛋白位于胞核。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 53 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCI-H2052 细胞中提取的交联染色质和 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 CTGF 内结合,CTGF 是一种已知的 YAP 靶标基因(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 54 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCI-H2052 细胞中提取的交联染色质和 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 6(上图)内的结合,包括 YAP 的已知靶标基因 CTGF(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 55 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 NCI-2052 细胞中提取的交联染色质与 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human CTGF Promoter Primers #14927、Human SMYD3 intron 2 primers 与 SimpleChIP® Human CTGF Upstream Primers #14928,通过实时 PCR对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 56 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCI-H2052 细胞和 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 测定。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示结合作用遍及 YAP 的已知靶标基因 TSPAN2(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 57 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCI-H2052 细胞和 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 测定。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 1 (上图)内的结合,包括 YAP 的已知靶基因 TSPAN2(下图)(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
    Phospho-YAP/TAZ Antibody Sampler Kit: Image 58 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,通过 NCI-H2052 细胞和 YAP (D8H1X) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用人 C1D 下游引物、人 TSPAN2 上游引物和人 ITM2A 下游引物进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。