Revision 1

#12599Store at -20C

1 个试剂盒

(5 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb 4991 20 µl 230 kDa Rabbit IgG
Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody 2474 20 µl 230 kDa Rabbit 
Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1059) (D5A6) Rabbit mAb 3817 20 µl 230 kDa Rabbit IgG
Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (D5B11) Rabbit mAb 3770 20 µl 230 kDa Rabbit IgG
VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb 9698 20 µl 210, 230 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit provides an economical means of evaluating the VEGFR2 tyrosine kinase and several phosphorylation sites that are involved in its activation. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Vascular endothelial growth factor receptor 2 (VEGFR2, KDR, Flk-1) is a major receptor for VEGF-induced signaling in endothelial cells. Upon ligand binding, VEGFR2 undergoes autophosphorylation and becomes activated (1). Major autophosphorylation sites of VEGFR2 are located in the kinase insert domain (Tyr951/996) and in the tyrosine kinase catalytic domain (Tyr1054/1059) (2). Activation of the receptor leads to rapid recruitment of adaptor proteins, including Shc, GRB2, PI3 kinase, NCK, and the protein tyrosine phosphatases SHP-1 and SHP-2 (3). Phosphorylation at Tyr1212 provides a docking site for GRB2 binding and phospho-Tyr1175 binds the p85 subunit of PI3 kinase and PLCγ, as well as Shb (1,4,5). Signaling from VEGFR2 is necessary for the execution of VEGF-stimulated proliferation, chemotaxis and sprouting, as well as survival of cultured endothelial cells in vitro and angiogenesis in vivo (6-8).

  1. Meyer, M. et al. (1999) EMBO J 18, 363-74.
  2. Dougher-Vermazen, M. et al. (1994) Biochem Biophys Res Commun 205, 728-38.
  3. Kroll, J. and Waltenberger, J. (1997) J Biol Chem 272, 32521-7.
  4. Takahashi, T. et al. (2001) EMBO J 20, 2768-78.
  5. Holmqvist, K. et al. (2004) J Biol Chem 279, 22267-75.
  6. Karkkainen, M.J. and Petrova, T.V. (2000) Oncogene 19, 5598-605.
  7. Rahimi, N. et al. (2000) J Biol Chem 275, 16986-92.
  8. Claesson-Welsh, L. (2003) Biochem Soc Trans 31, 20-4.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #12599

    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit

    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对表达包含人 CSF-1 胞外结合域/小鼠 VEGF 受体 2 胞内域的嵌合受体的 CKR/PAE 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析(Rahimi, N. 等人,(2000) J. Biol. Chem. 275、16986-16992),使用 Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr996) Antibody(上图)或 VEGF receptor 2 antibody(下图)。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1175) (D5B11) Rabbit mAb(上图)和 VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAb #2479(下图)对未经处理或已经 VEGF #9943 刺激的 HUVEC 的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1059) (D5A6) Rabbit mAb(上图)和 VEGF Receptor 2 (55B11) Rabbit mAb #2479(下图)对未经处理或已经 CSF-1 刺激的 PAE/CKR 细胞进行蛋白质印迹分析。PAE/CKR 细胞表达由人 CSF-1 受体胞外域及小鼠 VEGF 受体 2 跨膜和胞内域组成的一种嵌合受体。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb(上图)和 VEGF Receptor 2 Antibody # 2472(下图)对未经处理或已经 λ 磷酸酶处理的重组人 GST-VEGF 受体 2 (Val789-Val1356) 进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb(VEGFR2 表达,上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb (#8457)(用于上样对照)对 HUVE 细胞、Hela 细胞和小鼠心脏细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。(80 kDa 的条带表示部分降解产物)。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb 特异性结合磷酸化 VEGFR2,但不能特异性结合其他磷酸化酪氨酸激酶。使用 Phospho-VEGF Receptor-2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb(上图)或 Phospho-Tyrosine Mouse mAb (P-Tyr-100) #9411(下图)对表达不同激活的酪氨酸激酶蛋白的细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。CKR/PAE 细胞(泳道 13 和 14)表达包含人 CSF-1 胞外结合域/小鼠 VEGF 受体 2 胞内域的嵌合受体 (5)。CSF-1 会刺激 VEGF 受体 2 胞内域中的 Tyr951 磷酸化(泳道 13),并且使用 Phospho-VEGF Receptor-2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb 可特异性检测这种磷酸化。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人血管肉瘤细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肝细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 VEGFR2 (D5B1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HCC827 异种移植物进行免疫组织化学分析。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb(绿色)和 β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (IF Preferred) #2677(红色)对大鼠胰腺细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 VEGF Receptor 2 (D5B1) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对固定和通透的 HeLa 细胞(蓝色,阴性)和 HUVE 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。