Revision 1

#8350Store at -20C

1 个试剂盒

(4 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb 4308 20 µl 200 kDa Rabbit IgG
Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody 3615 20 µl 200 kDa Rabbit 
Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb 3617 20 µl 200 kDa Rabbit IgG
Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) Antibody 5584 20 µl 200 kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit provides an economical means to investigate protein folding within the cell. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two western blot experiments per primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Tuberin is a product of the TSC2 tumor suppressor gene and an important regulator of cell proliferation and tumor development (1). Mutations in either TSC2 or the related TSC1 (hamartin) gene cause tuberous sclerosis complex (TSC), an autosomal dominant disorder characterized by development of multiple, widespread non-malignant tumors (2). Tuberin is directly phosphorylated at Thr1462 by Akt/PKB (3). Phosphorylation at Thr1462 and Tyr1571 regulates tuberin-hamartin complexes and tuberin activity (3-5). In addition, tuberin inhibits the mammalian target of rapamycin (mTOR), which promotes inhibition of p70 S6 kinase, activation of eukaryotic initiation factor 4E binding protein 1 (4E-BP1, an inhibitor of translation initiation), and eventual inhibition of translation (3,6,7).

  1. Soucek, T. et al. (1998) Proc Natl Acad Sci U S A 95, 15653-8.
  2. Sparagana, S.P. and Roach, E.S. (2000) Curr Opin Neurol 13, 115-9.
  3. Manning, B.D. et al. (2002) Mol Cell 10, 151-62.
  4. Aicher, L.D. et al. (2001) J Biol Chem 276, 21017-21.
  5. Dan, H.C. et al. (2002) J Biol Chem 277, 35364-70.
  6. Goncharova, E.A. et al. (2002) J Biol Chem 277, 30958-67.
  7. Inoki, K. et al. (2002) Nat Cell Biol 4, 648-57.

Background References

    Trademarks and Patents

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    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    Revision 1
    #8350

    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit

    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from COS-7 cells using Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb #4308. 虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 66-440 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) Antibody(上图)、Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) Antibody #3611(中图)或 Tuberin/TSC2 Antibody #3612(下图)对未经处理的、已经 PDGF 处理、已经 PDGF 和 wortmannin 处理、已经 PDGF 和 rapamycin 处理的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho- Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAb(上图)或 Tuberin Antibody(下图)对已经 l 磷酸酶或 PDGF 处理的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb 对 SH-SY5Y 细胞和大鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) Antibody(上图)和 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb #4308(下图)对未经处理或已经 AICAR #9944 处理(2 mM,30 分钟)的 SH-SY5Y 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb(上图)和 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691(下图)对野生型 (wt) 和 TSC2 缺损型 (-/-) 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1387) Antibody对已经 AICAR #9944 处理(2 mM,30 分钟)的 SH-SY5Y 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。通过蛋白转印后使用 (+) 或不使用 (-) 小牛肠磷酸酶 (CIP) 处理膜,验证该抗体的磷酸特异性。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb(上图)对 HAP1 WT(左图)或 TSC2 KO(右图)细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。用 Ponceau S 染色的膜进行总蛋白标准化(下图)。这些数据由 YCharOS Inc. 提供,该公司是一家开放科学公司,作为 CST 科学家生成的验证数据的合作伙伴,其使命是表征市售抗体。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb(绿色)对 SH-SY5Y(左图)、野生型 MEF(中图)和 TSC2 缺损型 (-/-) MEF 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Phospho-TSC2 Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Tuberin/TSC2 (D93F12) XP® Rabbit mAb 对野生型 MEF 细胞(绿色)和 TSC2 缺损型 (-/-) MEF 细胞(蓝色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。