Revision 1

#9938Store at -20C

1 个试剂盒

(3 x 40 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 4370 80 µl 44, 42 kDa Rabbit IgG
Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (81E11) Rabbit mAb 4668 40 µl 46, 54 kDa Rabbit IgG
Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb 4631 40 µl 43 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 40 µl Goat 
U0126 9903 0.3 mg  

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit contains 40 µl of each primary rabbit monoclonal antibody [Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204), Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185), Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182)], 50 µl of anti-rabbit IgG secondary antibody (HRP conjugated) and 0.3 mg of the MEK1/2 Inhibitor (U0126).

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

p44/42 MAPK (Erk1/2), SAPK/JNK, and p38 MAPK function in protein kinase cascades that play a critical role in the regulation of cell growth, differentiation, and control of cellular responses to cytokines and stress. p44/42 MAPK is activated by growth and neurotrophic factors. Activation occurs through phosphorylation of threonine and tyrosine residues (Thr202 and Tyr204 in human Erk1) at the sequence T*EY* by a single upstream MAP kinase kinase (MEK). SAPK/JNK and p38 MAPK are activated by inflammatory cytokines and by a wide variety of cellular stresses. Activation of SAPK/JNK occurs via phosphorylation at Thr183 and Tyr185 by the dual specificity enzyme SEK/MKK4. Both MKK3 and SEK phosphorylate p38 MAPK on tyrosine and threonine at the sequence T*GY* to activate p38 MAP kinase (1-5).

  1. Lewis, T. S. et al. (1998) Adv. Cancer Res. 74, 49-139.
  2. Garrington, T.P. and Johnson, G.L. (1999) Curr. Opin. Cell. Biol. 11, 211-218.
  3. Schaeffer, H.J. and Weber, M.J. (1999) Mol. Cell. Biol. 19, 2435-2444.
  4. Whitmarsh, A.J. and Davis, R.J. (1998) Trends Biochem. Sci. 23, 481-485.
  5. Cobb, M.H. (1999) Prog. Biophys. Mol. Biol. 71, 479-500.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #9938

    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit

    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from serum-starved HeLa cells treated with TPA (400 nM, 4 hours) using Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370. 虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例在 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (81E11) Rabbit mAb #4668 对经过紫外线(50 mJ,恢复 30 分钟)处理的 HEK293 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道视图(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的两个靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370 和 p44/42 MAPK (Erk1/2) (3A7) Mouse mAb #9107,对未经处理或经 U0126 #9903(10 µM,1 小时)或 TPA #4174(200 nM,10 分钟)处理的 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb,对未经处理或按指定要求处理的 Jurkat、NIH/3T3 和 pC12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (81E11) Rabbit mAb 对未经处理的或经紫外线处理的 293 细胞、未经处理或经紫外线处理的 NIH/3T3 细胞、或未经处理或经 anisomycin 处理的 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb(上)或 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb #4695(下),对经 λ 磷酸酶或 TPA #4174 处理(如图)的 293 NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb 对石蜡包埋肺癌进行免疫组织化学分析,显示核定位。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    在对照肽(左)或 Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) Blocking Peptide #1215(右)存在的情况下,使用 Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (81E11) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb,对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb 对石蜡包埋结肠癌进行免疫组织化学分析,显示核定位。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (81E11) Rabbit mAb 对未经处理的(左)或经紫外线处理(右)的石蜡包埋 293T 细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb,对未经处理(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb,对未经处理 (左图) 或 CIP 磷酸酶处理 (右图) 的石蜡包埋人胶质母细胞瘤进行免疫组织化学分析。

    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 对 SignalSlide Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) IHC Controls #8103( 经过 U0126 #9903(左图)或 TPA #4174(右图)处理的石蜡包埋的 NIH/3T3 细胞)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb (左图) 或使用抗原磷酸肽预孵育的相同抗体 (右图),对石蜡包埋的乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370(绿色)和 S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb #2317(红色),对未经处理(上)或经 λ 磷酸酶处理(下)的果蝇卵泡进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (12F8) Rabbit mAb,对未经处理 (左图) 或 Anisomycin (右图) 的石蜡包埋 NIH/3T3 细胞进行免疫组织化学分析。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对饥饿过夜,然后用 U0126 #9903(10 uM,2 小时;左)或 PDBu (Phorbol 12,13-Dibutyrate) #12808(100 nM,15 分钟;右)处理的 HT1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Phospho-p38 MAPK (绿色) 对-/+λ 紫外线处理的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。未经处理细胞 (左图) 无染色及经处理细胞在核定位 (右图) 。红色 = 肌动蛋白丝 (phalloidin)。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对经 U0126(10 µM,2 小时;绿色)处理或经 TPA #4174 (200 nM,30 分钟;蓝色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Phospho-MAPK Family Rabbit mAb Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) 对 3T3 细胞提取物进行免疫沉淀分析。细胞用 TPA(200 nM,15 分钟)处理。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb。使用 Phosphop44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb #45262 作为二抗。