Revision 4

#9958Store at -20C

1 个试剂盒

(3 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-IKKα (Ser176)/IKKβ (Ser177) (C84E11) Rabbit mAb 2078 20 µl 85 (IKKalpha), 87 (IKKbeta) kDa Rabbit 
Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 2697 20 µl 85 IKK-alpha 87 IKK-beta kDa Rabbit IgG
Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody II 2694 20 µl 85 IKK-alpha 87 IKK-beta kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

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Description

The Phospho-IKKalpha/beta (Ser176/180) Antibody Sampler Kit contains reagents to examine protein levels of IKKalpha when phosphorylated at Ser176/180 and IKKbeta when phosphorylated at Ser177/181. The kit contains primary and secondary antibodies to perform two Western blots with each antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The NF-κB/Rel transcription factors are present in the cytosol in an inactive state, complexed with the inhibitory IκB proteins (1-3). Most agents that activate NF-κB do so through a common pathway based on phosphorylation-induced, proteasome-mediated degradation of IκB (3-7). The key regulatory step in this pathway involves activation of a high molecular weight IκB kinase (IKK) complex whose catalysis is generally carried out by three tightly associated IKK subunits. IKKα and IKKβ serve as the catalytic subunits of the kinase and IKKγ serves as the regulatory subunit (8,9). Activation of IKK depends upon phosphorylation at Ser177 and Ser181 in the activation loop of IKKβ (Ser176 and Ser180 in IKKα), which causes conformational changes, resulting in kinase activation (10-13).

  1. Baeuerle, P.A. and Baltimore, D. (1988) Science 242, 540-6.
  2. Beg, A.A. and Baldwin, A.S. (1993) Genes Dev 7, 2064-70.
  3. Finco, T.S. et al. (1994) Proc Natl Acad Sci USA 91, 11884-8.
  4. Brown, K. et al. (1995) Science 267, 1485-8.
  5. Brockman, J.A. et al. (1995) Mol Cell Biol 15, 2809-18.
  6. Traenckner, E.B. et al. (1995) EMBO J 14, 2876-83.
  7. Chen, Z.J. et al. (1996) Cell 84, 853-62.
  8. Zandi, E. et al. (1997) Cell 91, 243-52.
  9. Karin, M. (1999) Oncogene 18, 6867-74.
  10. DiDonato, J.A. et al. (1997) Nature 388, 548-54.
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  12. Johnson, L.N. et al. (1996) Cell 85, 149-58.
  13. Delhase, M. et al. (1999) Science 284, 309-13.

Background References

    Trademarks and Patents

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    Revision 4
    #9958

    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit

    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα (Ser176)/IKKβ (Ser177) (C84E11) Rabbit mAb (上图),IKKα Antibody2682(中图) 和 IIKKβ (2C8) Rabbit mAb2370(下图),对未经处理或经 LPS 处理15分钟的分化 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody II (上图) 或 IKKβ Antibody #2684(下图),对经 TNF-α 处理指定时间的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对来自 THP-1 细胞(用 TPA(#9905,80 nM 24 小时)分化并用 1 μg/ml LPS 处理所示时间)的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 #2697(上图)或 IKKα (D3W6N) Rabbit mAb #61294、IKKβ (D30C6) Rabbit mAb #8943(中图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理或已经过 TNFa(#16789,20 ng/mL,10 分钟)和 Calyculin A(#9902,100 nM,10 分钟)处理的 HeLa 细胞提取物、对已经过 TPA(#4174,80 nM,16 小时)分化且未经处理和已经过 LPS (#14011,1 μg/ml,1 小时)处理的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胆囊(慢性胆囊炎)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌(未处理(左)或 λ 磷酸酶处理(右))进行免疫组织化学分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析,显示其胞质定位。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺(慢性支气管炎)进行免疫组织化学分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    在对照肽(左)或 Phospho-IKK-alpha/beta (Ser176/180) Blocking Peptide #1023(右)存在的情况下,使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 IKK-α (Ser176/Ser180) phosphate Rabbit mAb 对 THP-1 细胞(未处理(蓝色)和用 TPA 和 LPS 处理(绿色))进行流式细胞分析。使用 Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (PE Conjugate) #8885 作为二抗。
    Phospho-IKKα/β (Ser176/180) Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-IKKα/β (Ser176/180) (16A6) Rabbit mAb 对来自 TNF-α 处理和 Calyculin A 处理的 HeLa 细胞和 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。