Revision 1

#4766Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 6956 20 µl 65 kDa Mouse IgG2b
RelB (C1E4) Rabbit mAb 4922 20 µl 70 kDa Rabbit IgG
c-Rel (D4Y6M) Rabbit mAb 12707 20 µl 68-78 kDa Rabbit IgG
NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 12540 20 µl 50 Active form. 120 Precursor kDa Rabbit IgG
NF-κB1 p105 Antibody 4717 20 µl 120 kDa Rabbit 
NF-κB2 p100/p52 Antibody 4882 20 µl 52 (mature). 120 (precursor). kDa Rabbit 
NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 3017 20 µl 52 active form. 120 precursor. kDa Rabbit IgG
NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 8242 20 µl 65 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

This kit contains reagents to examine total protein levels of the five NF-κB/Rel family members: p65/RelA, RelB, c-Rel, NF-κB1 (p105/p50) and NF-κB2 (p100/p52).

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Transcription factors of the nuclear factor κB (NF-κB)/Rel family play a pivotal role in inflammatory and immune responses (1,2). There are five family members in mammals: RelA, c-Rel, RelB, NF-κB1 (p105/p50), and NF-κB2 (p100/p52). Both p105 and p100 are proteolytically processed by the proteasome to produce p50 and p52, respectively. Rel proteins bind p50 and p52 to form dimeric complexes that bind DNA and regulate transcription. In unstimulated cells, NF-κB is sequestered in the cytoplasm by IκB inhibitory proteins (3-5). NF-κB-activating agents can induce the phosphorylation of IκB proteins, targeting them for rapid degradation through the ubiquitin-proteasome pathway and releasing NF-κB to enter the nucleus where it regulates gene expression (6-8). NIK and IKKα (IKK1) regulate the phosphorylation and processing of NF-κB2 (p100) to produce p52, which translocates to the nucleus (9-11).

  1. Baeuerle, P.A. and Henkel, T. (1994) Annu Rev Immunol 12, 141-79.
  2. Baeuerle, P.A. and Baltimore, D. (1996) Cell 87, 13-20.
  3. Haskill, S. et al. (1991) Cell 65, 1281-9.
  4. Thompson, J.E. et al. (1995) Cell 80, 573-82.
  5. Whiteside, S.T. et al. (1997) EMBO J 16, 1413-26.
  6. Traenckner, E.B. et al. (1995) EMBO J 14, 2876-83.
  7. Scherer, D.C. et al. (1995) Proc Natl Acad Sci USA 92, 11259-63.
  8. Chen, Z.J. et al. (1996) Cell 84, 853-62.
  9. Senftleben, U. et al. (2001) Science 293, 1495-9.
  10. Coope, H.J. et al. (2002) EMBO J 21, 5375-85.
  11. Xiao, G. et al. (2001) Mol Cell 7, 401-9.

Background References

    Trademarks and Patents

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    Revision 1
    #4766

    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit

    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物的 NF-kB p65 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 用 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 进行沉淀,泳道 3 为 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb #6956。使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb #8242 进行蛋白质印迹法分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image

    对 HeLa 细胞提取物的 NF-kB p65 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 用 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 进行沉淀,泳道 3 为 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb #6956。使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb #8242 进行蛋白质印迹法分析。

    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb #8242 对 HeLa 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 c-Rel (D4Y6M) Rabbit mAb,对来自不同细胞系和组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 NF-kB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 对来自 HeLa 细胞和 COS 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HDLM-2 细胞和 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb、NF-κB2 p100/p52 (D7A9K) Rabbit mAb #37359 或 NF-κB2 p100/p52 (D9S3M) Rabbit mAb #52583 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 BIRC3 基因内结合。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105 Antibody,对 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析,而 THP-1 细胞经 TPA(#9905,80 nM 24 小时)分化并用 1 μg/ml LPS 按所示时间进行处理。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 NF-kappaB2 p100 Antibody 对来自 THP-1 细胞、L929 细胞、C6 细胞和 COS 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 RelB (C1E4) Rabbit mAb 对来自 Raji 细胞、THP-1 细胞和 BaF3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HDLM-2 细胞和 RelB (C1E4) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 BIRC3 基因内结合。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb #6956(上图)或 β-actin (13E5) Rabbit mAb #4970 (下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1) 或 NF-κB p65 敲除型 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹法分析。NF-κB p65 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了该抗体对 NF-κB p65 的特异性。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    以浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415(虚线)作为对照,使用 NF-kB p65 (L8F6) Mouse mAb(实线)对 MCF7 细胞进行流式细胞分析。Anti-mouse IgG (H+L),F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*,它可在酶催化的分解期间发光。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对来自 HeLa 细胞(未处理 (-) 或用 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 (10ng/ml) 处理所示时间)的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 c-Rel (D4Y6M) Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下),对用 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® c-Rel siRNA I (Mouse Specific) #13058 (+) 或 SignalSilence® c-Rel siRNA II (Mouse Specific) #13170 (+) 转染的 Neuro-2a 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。c-Rel (D4Y6M) Rabbit mAb 可证实 c-Rel 表达沉默,而使用 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 作为上样对照。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HDLM-2 细胞和 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb、NF-κB2 p100/p52 (D7A9K) Rabbit mAb #37359 或 NF-κB2 p100/p52 (D9S3M) Rabbit mAb #52583 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 11(上图)内的结合,包括 BIRC3 基因(下图)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HCT 116 细胞沉淀物(左图,高表达)或 MCF7 细胞沉淀物(右图,低表达)进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HDLM-2 细胞和 RelB (C1E4) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 11(上图)内的结合,包括 BIRC3 基因(下图)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb(上)或 α-Tubulin (11Η10) Rabbit mAb #2125(下)时,对来自 HeLa 细胞(用 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® NF-κB p65 siRNA I #6261 (+) 转染)的提取物进行蛋白质印迹分析。NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 证实 NF-κB p65 表达沉默,而使用 α-Tubulin (11Η10) Rabbit mAb 作为内参对照。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 (30 ng/ml) 处理 1 小时的 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552、人 IAP2 启动子引物和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人骨肉瘤细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对€‚ HDLM-2 细胞和 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对€‚ HDLM-2 细胞和 RelB (C1E4) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    在 SignalSlide® NF-κB p65 IHC Controls #12873(石蜡包埋的 HCT116 细胞(未处理(左)或用 hTNF-α #8902 处理(右))上使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 对人慢性胆囊炎组织进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人慢性胆囊炎进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 B 细胞非霍奇金氏淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 对石蜡包埋的 OVCAR8 细胞沉淀物(用 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 处理(左)或用 SignalSilence® NF-κB p65 siRNA I #6261 处理(右))进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 NF-κB p65(D14E12) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HT-1080 细胞(未处理(左)或用 hTNF-α #8902 处理(20 ng/ml,20 分钟)(右))进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    与非特异性阴性对照抗体(红色)相比,使用 NF-κB2 p100/p52 (18D10) Rabbit mAb(蓝色)对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 对石蜡包埋的 HeLa 细胞沉淀物(未处理(左)或用 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 处理(右))进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(红色)相比,使用 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb(蓝色)对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜样腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb(绿色)对 HeLa 细胞(未处理(左)或用 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902 处理(20 ng/mL,20 分钟;右))进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。本图显示整个 IL-8(NFκB 的一个已知靶标基因)范围内的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    以浓度匹配的 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415(虚线)作为对照,使用 NF-kB p65 (L8F6) Mouse mAb(实线)对 MCF7 细胞 进行流式细胞分析。使用 Anti-mouse IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4408 作为二抗。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体4(上图)内的结合,包括 NFκB 的已知靶标基因 IL-8(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的正常人胸腺进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 Human Tumor Necrosis Factor-α (hTNF-α) #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞中提取的交联染色质,在加入 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552、人 IL-8 启动子引物和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 Hela 细胞中提取的交联染色质,在加入 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human IκBα Promoter Primers #5552、人 IL-8 启动子引物和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脾脏进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞和 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。€‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 NF-κB p65 的已知靶基因 LAMC2 内结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 51 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的正常小鼠胸腺进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 52 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞和 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。€‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 1(上图)内结合,包括 NF-κB p65 的已知靶基因 LAMC2(下图)(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 53 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb(上图)或 NF-κB1 p105/p50 Rabbit mAb(下图)对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞(左图)、正常人脾脏(中图)或 4T1 同系乳腺肿瘤(右图)进行免疫组织化学分析。这两种抗体检测 NF-κB1 p105/p50 蛋白上独特的、非重叠的表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 54 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经 hTNF-α #8902(30 ng/ml,1 小时)处理的 HeLa 细胞和 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用人 LAMC2 上游引物和人 ITM2A 下游引物进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 55 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右图)作为对照,使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb(左图)对石蜡包埋的正常人阑尾进行免疫组织化学分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 56 Expand Image
    对 CHO 细胞提取物的 NF-kB p65 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 进行沉淀,泳道 3 为 NF-κB p65 (D14E12) XP® Rabbit mAb #8242。使用 NF-κB p65 (L8F6) Mouse mAb #6956 进行蛋白质印迹法分析。
    NF-κB Family Member Antibody Sampler Kit: Image 57 Expand Image
    使用 NF-κB1 p105/p50 (D7H5M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 野生型(左图,阳性)或 NF-κB1 敲除型 MEF 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。