Revision 1

#16029Store at -20C

1 个试剂盒

(7 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
STING (D1V5L) Rabbit mAb 50494 20 µl 33, 35 kDa Rabbit IgG
Phospho-STING (Ser365) (D8F4W) Rabbit mAb 72971 20 µl 41 kDa Rabbit IgG
cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 31659 20 µl 62 kDa Rabbit IgG
TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 3504 20 µl 84 kDa Rabbit IgG
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb 5483 20 µl 84 kDa Rabbit IgG
IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 4302 20 µl 45-55 kDa Rabbit IgG
Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb 29047 20 µl 45-55 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting activation and expression of key components of the STING pathway using phospho-specific and control antibodies. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Stimulator of interferon genes (STING, TMEM173, MITA) is a transmembrane adaptor protein that is a critical component of the cellular innate immune response to pathogenic cytoplasmic DNA (1,2). STING is a ubiquitously expressed protein found predominantly in the ER (1). The enzyme cGAMP synthase (cGAS) produces the second messenger cyclic-GMP-AMP (cGAMP) in response to cytoplasmic DNA (3,4). cGAMP binds and activates STING (3,4). In addition, detection of cytoplasmic DNA by nucleic acid sensors, including DDX41 or IFI16, results in STING activation (5,6). Following activation, STING translocates with TBK1 to perinuclear endosomes and gets phosphorylated by ULK1 at Ser366 (Ser365 in mouse) (7,8). The TBK1 kinase phosphorylates and activates IRF-3 and NF-κB, which leads to the induction of type I interferon and other immune response genes (1,2,7).

  1. Ishikawa, H. and Barber, G.N. (2008) Nature 455, 674-8.
  2. Zhong, B. et al. (2008) Immunity 29, 538-50.
  3. Sun, L. et al. (2013) Science 339, 786-91.
  4. Wu, J. et al. (2013) Science 339, 826-30.
  5. Zhang, Z. et al. (2011) Nat Immunol 12, 959-65.
  6. Unterholzner, L. et al. (2010) Nat Immunol 11, 997-1004.
  7. Ishikawa, H. et al. (2009) Nature 461, 788-92.
  8. Konno, H. et al. (2013) Cell 155, 688-98.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #16029

    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit

    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (上图) 、IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb #4302 (中图) 、以及β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图) ，对未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; +) 转染的野生型 (WT) 小鼠脂肪细胞，以及未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6 hr; +) 转染的 IRF-3 (-/-) 小鼠脂肪细胞进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 对 3T3 细胞、Neuro-2a 细胞和 C2C12 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 TBK/NAK (D1B4) 兔单克隆抗体 #3504（上图）或 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457（下图）对未经处理 (-) 的或 TBK1/NAK 敲除型 (+) HCT116 细胞提取物进行蛋白印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb, #4302（上图）或 β-actin (13E5) Rabbit mAb, #4970（下图）对对照型 HeLa 细胞（泳道 1） 或 IRF-3 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2） 的提取物进行蛋白质印迹法分析。IRF-3 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 IRF-3 的特异性。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 STING (D1V5L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb（上图）或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504（下图）对用 TPA #4174（80 nM，过夜）分化后用 LPS (1 μg/ml) 处理长达 24 小时的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-STING (Ser365) (D8F4W) Rabbit mAb（上图）、STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred) #50494（中间）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未转染 (-) 或转染 poly(dA:dT)（5 μg/mL，3 小时；+）的 Raw 264.7 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (上图) 或 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb #11904 (下图) ，未经转染 (-) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; +) 转染的 HT-29 细胞进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长小鼠 cGAS 蛋白 (mcGAS-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 对转染空载或经人、小鼠或大鼠 IRF-3 构建转染的 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。人和小鼠构建体含有表位标记。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    对 Raw 264.7 细胞提取物STING进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input，泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 是 STING (D1V5L) Rabbit mAb。使用 STING (D1V5L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb（上图）或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504（下图）对用 TPA #4174（80 nM，过夜）分化后用 LPS（1 μg/ml，1 小时）处理、未经处理或已经磷酸酶处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (绿色) 及 EpCAM (VU1D9) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #5488 (红色) ，对未经转染 (左图) 或经 Poly (I:C) (2.5 μg/ml, 6小时; 右图) 转染的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    对 C2C12 细胞提取物中的 cGAS 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb。使用 cGAS (D3O8O) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb（绿色）对用 TPA #4174（80nM，过夜）（左图）处理后用 LPS（1μg/ml，1 小时）（中图）处理或用 LPS 和 λ 磷酸酶处理（右图）的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DY-554 Phalloidin（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb，对未经转染 (A) 或经 Poly (I:C) (2.5 µg/ml, 6小时; B) 转染的野生型小鼠脂肪细胞，及未经转染 (C) 或经 Poly (I:C) (2.5 µg/ml, 6小时; D) 转染的 IRF-3 (-/-) 小鼠脂肪细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L) ,F (ab') 2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对用 TPA（80 nM，4 天）#9905 分化、未经处理（蓝色）或已经过 LPS（1 ug/ml，1 小时；绿色）#14011 处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) 兔单克隆抗体对未转染（蓝色）或转染 Poly (I:C)（2.5 μg/ml，6 小时；绿色）的 HT-29 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L) ,F (ab') 2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Mouse-Reactive STING Pathway Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-IRF-3 (Ser396) (4D4G) Rabbit mAb #4947（上）或 IRF-3 (D83B9) Rabbit mAb（下）对未处理或经 LPS（1 µg/ml，1 小时）处理的分化的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    图像库
    更多了解我们如何获得图像
    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。