Revision 1

#85741Store at -20C

1 个试剂盒

(6 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
IL-1β (3A6) Mouse mAb 12242 20 µl 17,31 kDa Mouse IgG1
CCL5/RANTES Antibody 2989 20 µl 10 kDa Rabbit 
PAI-1 Antibody 27535 20 µl 50 kDa Rabbit 
TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb 11948 20 µl 17,25,28 kDa Rabbit IgG
MCP-1 (E9R7Z) Rabbit mAb 41987 20 µl 11-13, 20-30 kDa Rabbit IgG
MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb 87809 20 µl 64,72 kDa Rabbit IgG
IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb 12912 20 µl 24 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting multiple components of the SASP in mouse samples. The kit includes enough antibodies to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

Senescence is characterized by stable stress-induced proliferative arrest and resistance to mitogenic stimuli, as well as the secretion of proteins such as cytokines, growth factors, and proteases. These secreted proteins comprise the senescence-associated secretory phenotype (SASP). Senescent cells are thought to accumulate as an organism ages, and contribute to age-related diseases, including cancer, through promotion of inflammation and disruption of normal cellular function (1,2). The composition of the SASP varies, and SASP components can be either beneficial or deleterious in human disease, depending on the context (3).
The Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit provides a collection of antibodies to various SASP components, including TNF-α, interleukin-6 (IL-6), the multifunctional cytokine IL-1β, the chemokines RANTES/CCL5 and MCP-1, the matrix metalloprotease MMP-2, and the serine-protease inhibitor PAI-1.

  1. Tchkonia, T. et al. (2013) J Clin Invest 123, 966-72.
  2. Sun, Y. et al. (2018) Trends Mol Med 24, 871-885.
  3. Rao, S.G. and Jackson, J.G. (2016) Trends Cancer 2, 676-687.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #85741

    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit

    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 IL-1β (3A6) Mouse mAb #12242 对经 TPA (80nM, O/N) 和 LPS（1ug/ml，1 小时）处理的 THP-1 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 2-40 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image

    使用 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb #87809 对来自 3T3-L1 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb#8457（下图），对未经处理 (-) 或经过 LPS（100 ng/mL，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/mL，持续刺激 3 小时）处理的 Raw 264.7 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 IL-1β (3A6) Mouse mAb（上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对未处理的 (-) 或经 LPS 处理（100ng/mL，3小时；+）的 THP-1 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经过 LPS（100 ng/ml，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/ml，刺激 3 小时；+）处理的 Raw 264.7 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 PAI-1 Antibody（上图）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对小鼠胎盘和小鼠脾脏的提取物进行蛋白质印迹分析。胎盘和脾脏之间 PAI-1 表达的差异与其报道的 RNA 表达谱一致（www.proteinatlas.org），从而证实了抗体对 PAI-1 的特异性。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 CCL5/RANTES Antibody 对转染空载或转染小鼠 CCL5/RANTES 的 Hela 细胞进行蛋白质印迹分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 MCP-1 (E9R7Z) 兔单克隆抗体（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经 (-) 或经 LPS #14011（1 μg/ml，过夜；+）处理的 RAW 264.7 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*，它可在酶催化的分解期间发光。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4O4T) Rabbit mAb，对 U87、3T3-L1 和 C2C12 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb 对 1 ng 重组小鼠  TNF-α #5178 进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 IL-1β (3A6) Mouse mAb（上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对未经处理 (-) 或经 Brefeldin A #9972（300ng/mL，持续刺激 3 小时；+）和 LPS（100ng/mL，6小时； +）处理的 Raw 264.7 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb 对重组 Mouse His6Interleukin-6 (mHis6IL-6) 进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    对 U87 细胞提取物的 MMP-2 蛋白质进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input，泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，而泳道 3 是 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb。使用 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb（泳道 3），对经过 LPS（100 ng/mL，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/mL，持续刺激 3 小时）处理的 Raw 264.7 细胞提取物进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) #3678 与 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076ntibody #作为二抗。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 IL-1β (3A6) Mouse mAb 对 1 ng 重组 Human Interleukin-1β (hIL-1β) #8900 和 1 ng 重组 Mouse Interleukin-1β (mIL-1β) # 5204进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb（泳道 3），对经过 LPS（100 ng/ml，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/ml，刺激 3 小时）处理的 Raw 264.7 细胞提取物中的 IL-6 进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb（绿色）对经过 LPS（100 ng/ml，6 小时；左图）处理或未经处理（右图）的 Raw 264.7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 IL-1-β (3A6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人大肠（慢性结肠炎）组织进行免疫组织化学分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb（绿色）对未经处理（左图）或经过 LPS（100 ng/ml，6 小时；右图）处理的 Raw 264.7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或经过 LPS（100 ng/ml，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/ml，持续处理 3 小时）处理（绿色）的 Raw 264.7 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 IL-1-β (3A6) Mouse mAb 对石蜡包埋的人大肠（直肠溃疡性慢性结肠炎）组织进行免疫组织化学分析。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb 对经过 LPS（100 ng/ml，6 小时）和 Brefeldin A #9972（300 ng/ml，LPS 处理持续 3 小时）处理（绿色）或者经过 Brefeldin A（300 ng/ml，3 小时）单独处理（蓝色）的 Raw 264.7 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。
    Mouse Reactive Senescence Associated Secretory Phenotype (SASP) Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 IL-1-β (3A6) Mouse mAb 对石蜡包埋的对照（左）或经 LPS 处理（右）的 THP-1 细胞团进行免疫组织化学分析。
    图像库
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