Revision 1

#8674Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
COX IV (3E11) Rabbit mAb 4850 20 µl 17 kDa Rabbit IgG
Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb 4280 20 µl 14 kDa Rabbit IgG
HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb 12165 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
PHB1 Antibody 2426 20 µl 29 kDa Rabbit 
Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAb 3205 20 µl 43 kDa Rabbit IgG
SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb  11998 20 µl 70 kDa Rabbit IgG
SOD1 (71G8) Mouse mAb 4266 20 µl 18 kDa Mouse IgG1
VDAC (D73D12) Rabbit mAb 4661 20 µl 32 kDa Rabbit IgG
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means to evaluate relevant mitochondial proteins. This kit contains enough primary antibody to perform two western blots per primary.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit contains a variety of antibodies directed against established mitochondrial proteins. Cytochrome c oxidase (COX) is a hetero-oligomeric enzyme consisting of 13 subunits localized to the inner mitochondrial membrane (1). Cytochrome c is a well conserved electron-transport protein and is part of the respiratory chain localized to the mitochondrial intermembrane space (2). HSP60 has primarily been known as a mitochondrial protein that is important for folding key proteins after import into the mitochondria (3). In the mitochondria, prohibitins (PHB1) mainly exist as membrane-bound ring complexes and function as chaperones maintaining mitochondrial protein stability during protein synthesis and transportation (4). In mammalian cells, the pyruvate dehydrogenase complex is located in the mitochondrial matrix (5). Succinate dehydrogenase (SDH), also known as Complex II or succinate quinone oxidoreductase, is a key component of the citric acid cycle and the electron transport chain (6). SOD1 is ubiquitously expressed and is localized in the cytosol, nucleus, and mitochondrial intermembrane space (7). Voltage-dependent anion channel (VDAC), ubiquitously expressed and located in the outer mitochondrial membrane, is generally thought to be the primary means by which metabolites diffuse in and out of the mitochondria (8).

  1. Ostermeier, C. et al. (1996) Curr Opin Struct Biol 6, 460-6.
  2. Schägger, H. (2002) Biochim Biophys Acta 1555, 154-9.
  3. Jindal, S. et al. (1989) Mol Cell Biol 9, 2279-83.
  4. Tatsuta, T. et al. (2005) Mol Biol Cell 16, 248-59.
  5. Strumiło, S. (2005) Acta Biochim Pol 52, 759-64.
  6. Oyedotun, K.S. and Lemire, B.D. (2004) J Biol Chem 279, 9424-31.
  7. Sherman, L. et al. (1983) Proc Natl Acad Sci U S A 80, 5465-9.
  8. Craigen, W.J. and Graham, B.H. (2008) J Bioenerg Biomembr 40, 207-12.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    Revision 1
    #8674

    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit

    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对来自 MCF7 细胞提取物的 SOD1 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 用 Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415 进行沉淀,泳道 3 为 SOD1 (71G8) Mouse mAb #4266。使用 SOD1 (E4G1H) XP® Rabbit mAb #37385 进行蛋白质印迹法分析,以防止重链和轻链 IgG 掩蔽。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 COX IV (3E11) Rabbit mAb #4850 对 COS-7 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例在 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess Simple Western 仪器上进行该实验。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 PHB1 Antibody 对 MCF-7、Neuro2A、PC12 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 SOD1 (71G8) Mouse mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb 对不同细胞系裂解物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 COX IV (3E11) Rabbit mAb 对 HeLa、Jurkat 和 COS 细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*,它可在酶催化的分解期间发光。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb(泳道 3),对 HeLa 细胞提取物 SDHA 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAb 对不同细胞系进行蛋白质印迹分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 COX IV (3E11) Rabbit mAb 对显示线粒体染色的石蜡包埋的人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb #4280 对石蜡包埋的 4T1 同系小鼠肿瘤进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人食道癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    在对照肽(左)或 Cox IV Blocking Peptide #1034(右)存在的情况下,使用 COX IV (3E11) Rabbit mAb ,对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 Pyruvate Dehydrogenase (C54G1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    在对照肽(左)或 Cytochrome c Blocking Peptide #1033(右)存在的情况下,使用 Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 COX IV Rabbit mAb 对石蜡包埋的 H1650 异种移植物进行免疫组织化学分析。注意人体癌细胞的特异性染色。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb(绿色)对 A-204 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Cytochrome c (136F3) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(红色)作为 HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb(蓝色)的对照,对 HeLa 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的小鼠骨骼肌细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    对用 COX IV (3E11) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色)标记的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 VDAC (D73D12) 兔单克隆抗体 对石蜡包埋的小鼠小肠细胞进行免疫组织化学分析。
    Mitochondrial Marker Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 COX IV (3E11) Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。