Revision 5

#73959Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 13667 20 µl 84, 92 kDa Rabbit IgG
MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb 87809 20 µl 64,72 kDa Rabbit IgG
MMP-3 (D7F5B) Rabbit mAb 14351 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 8946 20 µl 26 kDa Rabbit IgG
TIMP2 (D18B7) Rabbit mAb 5738 20 µl 22 kDa Rabbit IgG
TIMP3 (D74B10) Rabbit mAb 5673 20 µl 20, 25 kDa Rabbit IgG
MMP-7 Antibody 71031 20 µl 28 kDa Rabbit 
MT1-MMP (E3S5S) Rabbit mAb 26424 20 µl 62 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting different MMPs and TIMPs using the specific corresponding antibodies. The kit contains enough antibody to perform at least two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Matrix remodeling is mainly controlled by MMPs and TIMPs. The matrix metalloproteinase (MMP) family of proteases are a group of zinc-dependent enzymes that target extracellular proteins, including growth factors, cell surface receptors, adhesion molecules, matrix structural proteins, and other proteases (1, 2). Among the family members, MMP-2, MMP-3, MMP-7, MMP-9, and MMP14 (MT1-MMP) have been characterized as important factors for normal tissue remodeling during embryonic development, wound healing, tumor invasion, angiogenesis, carcinogenesis, and apoptosis (3). MMP activity is regulated by mechanisms of both transcriptional control and post translational protein processing. Once synthesized, MMPs exist as latent proenzymes. Maximum MMP activity requires proteolytic cleavage to generate active MMPs by releasing the inhibitory propeptide domain from the full-length protein (4). MMP activity can be inhibited through its binding to endogenously expressed TIMPs. TIMPs are members of the family of tissue inhibitors of matrix metalloproteinases that include TIMP1, TIMP2, TIMP3, and TIMP4. The main function of TIMPs is their inhibitory effect on MMPs. TIMPs irreversibly inactivate MMPs by direct binding MMPs and chelating their zinc cofactor at the catalytic site to inhibit the proteinase function (5,6).

  1. Kessenbrock, K. et al. (2010) Cell 141, 52-67.
  2. McCawley, L.J. and Matrisian, L.M. (2001) Curr Opin Cell Biol 13, 534-40.
  3. Page-McCaw, A. et al. (2007) Nat Rev Mol Cell Biol 8, 221-33.
  4. Hadler-Olsen, E. et al. (2011) FEBS J 278, 28-45.
  5. Nagase, H. et al. (2006) Cardiovasc Res 69, 562-73.
  6. Visse, R. and Nagase, H. (2003) Circ Res 92, 827-39.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 5
    #73959

    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit

    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image

    使用 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb #87809 对来自 3T3-L1 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb ,对未处理的 (-) 或已经过 TPA #4174 (200 nM,48 hr;+) 处理的 U-2 OS 细胞的浓缩、无血清培养基进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 MMP-3 (D7F5B) 兔单抗对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 MT1-MMP (E3S5S) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。MT1-MMP 蛋白在 HCC1419 细胞中阴性表达与预测的表达模式一致。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 TIMP3 (D74B10) 兔单克隆抗体对 A-431 和 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 TIMP2 (D18B7) Rabbit mAb 对 HT-1080、A172 和 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 MMP-7 Antibody 对 IGROV-1 和 HT-29 细胞系的浓缩培养基提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4O4T) Rabbit mAb,对 U87、3T3-L1 和 C2C12 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对未经处理 (-) 或已经过 TPA #4174(200 nM,48 小时;+)处理的 U-2 OS 细胞的提取物和浓缩培养基进行蛋白质印迹法分析。正如预期的那样,MMP-9 是由 TPA 处理诱导的。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    对 U87 细胞提取物的 MMP-2 蛋白质进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 是 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb。使用 MMP-2 (D2O4T) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人导管乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人食管癌组织进行免疫组织化学分析。

    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对未处理的(左)或已经过 TPA #4174(右)处理的石蜡包埋的 U-2 OS 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人正常胰腺组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人正常小肠组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右图)比较,使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb(左图)对石蜡包埋的人前列腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未经处理(蓝色)或经过 TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate) #4174(200 nM,24 小时;蓝色)或处理的 U-2 OS 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Matrix Remodeling Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 TIMP1 (D10E6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 U-87 MG 细胞沉淀物(左图,阳性)或 Ramos 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。