Revision 1

#57103Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 8478 20 µl 45-48 kDa Rabbit IgG
IRF-2 Antibody 4943 20 µl 45 kDa Rabbit 
IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 11904 20 µl 50-55 kDa Rabbit IgG
IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb 15106 20 µl 51 kDa Rabbit IgG
IRF-5 Antibody 20261 20 µl 60 kDa Rabbit 
IRF-6 Antibody 6948 20 µl 58, 60 kDa Rabbit 
IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAb 13014 20 µl 65 kDa Rabbit IgG
IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 5628 20 µl 50 kDa Rabbit IgG
IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb 76684 20 µl 48 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The IRF Family Antibody Sampler Kit contains reagents to examine the total protein levels of various IRF isoforms. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Polyclonal antibodies are supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA and 50% glycerol, and monoclonal antibodies also contain less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

Interferon regulatory factors (IRFs) comprise a family of transcription factors that function within the Jak/Stat pathway to regulate interferon (IFN) and IFN-inducible gene expression in response to viral infection (1). IRFs play an important role in pathogen defense, autoimmunity, lymphocyte development, cell growth, and susceptibility to transformation. The IRF family includes nine members: IRF-1, IRF-2, IRF-9/ISGF3γ, IRF-3, IRF-4 (Pip/LSIRF/ICSAT), IRF-5, IRF-6, IRF-7, and IRF-8/ICSBP. All IRF proteins share homology in their amino-terminal DNA-binding domains. IRF family members regulate transcription through interactions with proteins that share similar DNA-binding motifs, such as IFN-stimulated response elements (ISRE), IFN consensus sequences (ICS), and IFN regulatory elements (IRF-E) (2).

  1. Taniguchi, T. et al. (2001) Annu Rev Immunol 19, 623-55.
  2. Honda, K. and Taniguchi, T. (2006) Nat Rev Immunol 6, 644-58.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #57103

    IRF Family Antibody Sampler Kit

    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 IRF-3 (D6I4C) XP ® Rabbit mAb #11904 对 HeLa 细胞的裂解物 (1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Simple WesternTM analysis of lysates (1.0 mg/mL) from THP-1 cells using IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb #5628. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the JessTM Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 12-230 kDa separation module.
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb, #11904（上图）或 β-actin (13E5) Rabbit mAb, #4970（下图）对对照型 HeLa 细胞（泳道 1） 或 IRF-3 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。IRF-3 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了该抗体对 IRF-3 的特异性。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAb（上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对未处理 (-) 或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 （10 ng/ml， 过夜； +）处理的 HT-29 和 G-361 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb （上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下），对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 IRF-5 Antibody（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 IRF-2 Antibody 对来自 SR 细胞、Ramo 细胞和 A20 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 对未处理或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 （10 ng/ml; 过夜）处理的 Raji 和 Jurkat 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 IRF-6 Antibody，对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。先前已经报道 MCF7 细胞中不存在 IRF-6 (5)。已经报道二重峰因磷酸化所致 (6)。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb（上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb # 8457（下）对未处理(-) 或用 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (10 ng/ml, 16 小时; +) 处理的 HeLa 细胞进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对未处理或经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901 处理（100 ng/ml，4 小时））的 HeLa 细胞进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901（100 ng/ml，4 小时）处理的 HeLa 细胞和 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了 IRF-1 的已知靶标基因 ERAP2 内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)，SignalSilence® IRF-7 siRNA I #13139 (+) 或 SignalSilence® IRF-7 siRNA II #13291 (+) 转染的 HT-29 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。转染 24 小时后，使用 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 （10 ng/ml， 过夜； +）对细胞进行处理，然后使用 IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAb #13014（上）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下）对细胞进行蛋白质印迹分析。IRF-7 (D2A1J) Rabbit mAb 确认了 IRF-7 的表达沉默，而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则被用于上样对照。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    对来自 RPMI 8226 细胞提取物的 IRF-4 进行免疫沉淀。泳道 1 是10 % input，泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，并且泳道 3 是 IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb。使用 IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    对 HDLM-2 细胞提取物中的 IRF-5 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Normal Rabbit IgG #2729，泳道 3 为 IRF-5 Antibody。使用 IRF-5 Antibody 进行蛋白质印迹分析。使用 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb (HRP Conjugate) #93702 进行检测。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 对 THP-1、RL7 和 A20 细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901（100 ng/ml，4 小时）处理的 HeLa 细胞和 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在染色体 5（上图）内的结合，包括 IRF-1 的已知靶标基因 ERAP2（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb（泳道 3），对 THP-1 细胞提取物的 IRF-3进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 和 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 作为二抗。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对 H929 细胞的交联染色质和 IRF-4 (D9P5H) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 SSR2 基因内结合。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 对转染空载或转染表达人或小鼠的 IRF-8 载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    对 THP-1 细胞提取物中的 IRF-9 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 的输入，泳道 2 则是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，而泳道 3 是 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb。使用 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胸腺进行免疫组织化学分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #66362 对经 hTNF-α #8901（100 ng/ml，4 小时）处理的 HeLa 细胞和 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #86652 进行 CUT&RUN 分析。使用 human MOV10 intron 1 primers、human ERAP2 intron 1 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAb（绿色）对未经（左）或经 Poly (I:C)（2.5 μg/ml，6 小时；右）转染的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法） #9005 对 H929 细胞的交联染色质和 IRF-4 (D9P5H) 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 1（上图）内的结合，包括 SSR2（下图）。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，以取自于THP-1 细胞的交联染色质和 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。图形显示在 GPR18/UBAC2 内结合，GPR18/UBAC2 是一种已知的 IRF8 靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图形）。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb（绿色）对未处理（左） 或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (10 ng/ml, 16 小时; 右) 处理的 HeLa 进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    在对照肽（左）或 抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb ，对石蜡包埋的人类乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对来自 H929 细胞和 IRF-4 (D9P5H) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 的交联染色质进行染色质免疫沉淀。使用人 PRDM1 外显子 2 引物、SimpleChIP® Human SUB1 Promoter Primers #5156 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，以取自于THP-1 细胞的交联染色质和 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体13（上图）内的结合，包括 IRF8 的已知靶基因 GPR18/UBAC2（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) # #8927（10 nM，30 分钟）处理的 U266 细胞的交联染色质和 IRF-9 (D2T8M) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human MX1 Promoter Primers #57949 、human WARS intron 1 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 方法对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 4 x 106 THP-1 的交联染色质和 IRF-8 (D20D8) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用人类 GPR18 启动子引物 、SimpleChIP® Human MS4A7 Promoter Primers #9013 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 法对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胸腺进行免疫组织化学分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对对照（左）或 IFNγ 处理（右）的石蜡包埋的 HeLa 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb（绿色）对血清饥饿（左）或经 hIFNγ #8901 处理（100 ng/ml，4 小时；右）的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。用 DY-554 phalloidin 对肌动蛋白丝进行标记。
    IRF Family Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb 对未经（蓝色）或经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901 （绿色）处理（绿色）的 HeLa 细胞进行蛋白质印迹分析。
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