Revision 1

#12594Store at -20C

1 个试剂盒

(4 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb 9709 20 µl 27 kDa Rabbit IgG
HSP27 (G31) Mouse mAb 2402 20 µl 27 kDa Mouse IgG1
Phospho-HSP27 (Ser15) Antibody 2404 20 µl 27 kDa Rabbit 
Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody 2405 20 µl 27 kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The HSP27 Antibody Kit provides an economical means to evaluate the activation status of the HSP27 protein. The kit contains enough primary antibody to perform two western blot experiments per primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Heat shock protein (HSP) 27 is one of the small HSPs that are constitutively expressed at different levels in various cell types and tissues. Like other small HSPs, HSP27 is regulated at both the transcriptional and posttranslational levels (1). In response to stress, the HSP27 expression increases several-fold to confer cellular resistance to the adverse environmental change. HSP27 is phosphorylated at Ser15, Ser78, and Ser82 by MAPKAPK-2 as a result of the activation of the p38 MAP kinase pathway (2,3). Phosphorylation of HSP27 causes a change in its tertiary structure, which shifts from large homotypic multimers to dimers and monomers (4). It has been shown that phosphorylation and increased concentration of HSP27 modulates actin polymerization and reorganization (5,6).

  1. Stetler, R.A. et al. (2009) Curr Mol Med 9, 863-72.
  2. Landry, J. et al. (1992) J Biol Chem 267, 794-803.
  3. Rouse, J. et al. (1994) Cell 78, 1027-37.
  4. Rogalla, T. et al. (1999) J Biol Chem 274, 18947-56.
  5. Lavoie, J.N. et al. (1993) J Biol Chem 268, 24210-4.
  6. Rousseau, S. et al. (1997) Oncogene 15, 2169-77.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #12594

    HSP27 Antibody Sampler Kit

    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 HSP27 (G31) Mouse mAb #2402（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对 HeLa 细胞（泳道 1）或 HSP27 敲除型细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。HSP27 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对 HSP27 的特异性。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser15) Antibody（上）或 HSP27 (G31) Monoclonal Antibody #2402（下），对未经处理、经 anisomycin 或紫外线处理的 HeLa 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody（上）或 HSP27 (G31) mAb #2402（下），对未经处理、经 anisomycin 或紫外线处理的 HeLa 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*，它可在酶催化的分解期间发光。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb，对 HeLa 或 HT-29 细胞提取物进行蛋白质印迹分析，而 HeLa 或 HT-29 细胞为未经处理 (-) 或经紫外线（40 mJ/cm2，恢复30 分钟）或 Anisomycin（25 μg/mL，30 分钟）进行处理 (+)。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 HSP27 (G31) Mouse mAb 对 HeLa 和 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb，对对照（左）或经 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 HSP27 (G31) Mouse mAb 和 p44/42 MAPK (Erk1/2) (3A7) Mouse mAb #9107，对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® HSP27 siRNA I (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。HSP27 (G31) Mouse mAb 确认 HSP27 表达的沉默，而 p44/42 MAPK (Erk1/2) (3A7) Mouse mAb 被用于观察上样量及 HSP27 siRNA 的特异性。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 HSP27 (G31) Mouse mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用非特异性阴性对照抗体（红色）作为对照组，Phospho-HSP27 (Ser78) Antibody 对未经处理（蓝色）或经紫外线处理（绿色）的 HeLa 细胞进行流式细胞分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb，对对照（左）或经紫外线处理（右）的石蜡包埋 HeLa 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) Antibody #2401（上小图）或 HSP27 (G31) Mouse mAb（下小图），对未经处理（左小图）或经 λ 磷酸酶处理（右小图）的石蜡包埋人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 HSP27 (G31) Mouse mAb（绿色）对 A549 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。红色 = 碘化丙啶（DNA 荧光染料）。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌进行免疫组织化学分析。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb（绿色），对 NIH/3T3 细胞（右）、未经处理（左）或经 λ 磷酸酶处理（中）的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。NIH/3T3 细胞的负染色与 NIH/3T3 细胞在基础条件下不表达 HSP27 的观察结果一致 (5,7)。
    HSP27 Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb 对未经处理（蓝色）或经紫外线处理（绿色）的 HeLa 细胞进行流式细胞分析。
    图像库
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