Revision 1

#8579Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb 13619 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
LATS1 (C66B5) Rabbit mAb 3477 20 µl 140 kDa Rabbit IgG
Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb 8699 20 µl 24 kDa Rabbit IgG
MOB1 (E1N9D) Rabbit mAb 13730 20 µl 24 kDa Rabbit IgG
MST1 Antibody 3682 20 µl 59 kDa Rabbit 
MST2 Antibody 3952 20 µl 60 kDa Rabbit 
SAV1 (D6M6X) Rabbit mAb 13301 20 µl 45 kDa Rabbit IgG
Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb 13008 20 µl 65-78 kDa Rabbit IgG
YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb 8418 20 µl 55, 78 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Hippo Signaling Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting target proteins of the Hippo signaling pathway. The kit contains enough primary antibody to perform two western blots per primary.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Hippo signaling is an evolutionarily conserved pathway that controls cell proliferation, apoptosis, and organ size in response to changing cell density levels (1,2). At relative low cell density, transcription co-activators YAP and TAZ bind transcription factors to induce expression of genes that favor cell growth and proliferation. As cell density increases, interaction between membrane-bound upstream hippo pathway regulators trigger activation of cytoplasmic kinases Mst1/2 and LATS1/2. Activated Mst kinase (the eponymous Hippo in Drosophila) associates with the adaptor Sav1 and phosphorylates MOB1 to activate LATS kinase, which phosphorylates YAP and TAZ to suppress cell proliferation (3).

  1. McNeill, H. and Woodgett, J.R. (2010) Nat Rev Mol Cell Biol 11, 404-13.
  2. Zeng, Q. and Hong, W. (2008) Cancer Cell 13, 188-92.
  3. Zhao, B. et al. (2007) Genes Dev 21, 2747-61.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    Revision 1
    #8579

    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit

    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb #13008(上图)和 GAPDH (D6H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 SAV1 (D6M6X) Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对未处理 (-) 或经 λ-磷酸酶处理 (+) 的 Hep G2 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 蛋白同工型 1 Ser397 对应于 YAP 同工型 2 的 Ser381,如 Zhao 等人所报道 (2010) Genes Dev 24, 72-85 (9)
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 MOB1 (E1N9D) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 LATS1 (C66B5) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 MST1 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 MST2 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb(上)和 MOB1 Antibody #3863(下),对未处理 (-) 或用 H2O2(2.5mM,30 分钟)处理的 MCF7 细胞和未处理 (-) 或用 λ 磷酸酶处理 (+) 的 Ramo 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对未处理 (-) 或经 λ-磷酸酶处理 (+) 的 PANC-1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 SAV1 (D6M6X) Rabbit mAb (泳道 3),对来自 A-204 细胞提取物的 SAV1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 SAV1 (D6M6X) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8547(下),对经溶媒处理 (-) 或经肾上腺素(10 μM,60 分钟;+)或 Forskolin #3828(10 μm,60 分钟;+)处理的 MDA-MB-231 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 蛋白同工型 1 Ser397 对应于 YAP 同工型 2 的 Ser381,如 Zhao, B. 等人所报道 (2010) Genes Dev 24, 72-85 (9)
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 MOB1 (E1N9D) Rabbit mAb (泳道 3),对来自 HeLa 细胞提取物的 MOB1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 MOB1 (E1N9D) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 MST2 Antibody 对经 Staurosporine #9953 处理指定时间的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 YAP/TAZ (D24E4) Rabbit mAb #8418(上图)和 GAPDH (D6H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对 HeLa 细胞(泳道 1)或 YAP 敲除型细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹分析。YAP 敲除型 HeLa 细胞中没有信号,这证实了抗体对 YAP 的特异性。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人类肺癌进行免疫组织化学分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb(上)、YAP Antibody #4912(中)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对经溶媒处理 (-) 或用 Forskolin #3828(10 μM,60 分钟;+)或肾上腺素(10 μM,60 分钟;+)处理的 MDA-MB-231 细胞进行蛋白质印迹分析。注意,在经毛喉素或肾上腺素处理后,诱导 YAP (Ser127) 磷酸化与 Xu 等人报道的结果一致。(2012) [9]。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 SAV1 (D6M6X) Rabbit mAb(绿色),对 HCT 116(表达较高,左)和 ACHN(表达较低,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser397) (D1E7Y) Rabbit mAb,对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb ,对石蜡包埋的人卵巢(对照(左)或 λ 磷酸酶处理(右))进行免疫组织化学分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb,对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    显示不同的人 YAP 同工型中 Ser397 周围的氨基酸序列注释的示意图。星号 (*) 表示如 Zhao 等人所述的磷酸化位点的注释。2010 [9]。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Phospho-MOB1 (Thr35) (D2F10) Rabbit mAb,对石蜡包埋的 MCF7 细胞沉淀物(对照(左)或 H2O2 处理(右))进行免疫组织化学分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb ,对石蜡包埋的人结肠腺癌(对照(左)或 λ 磷酸酶处理(右))进行免疫组织化学分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物 A-204(左图)和 RL(右图)进行免疫组织化学分析。
    Hippo Signaling Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 Phospho-YAP (Ser127) (D9W2I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人类非小细胞肺癌进行免疫组织化学分析。