Revision 4

#48510Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Tyrosine Hydroxylase (E2L6M) Rabbit mAb 58844 20 µl 55-60 kDa Rabbit IgG
GAD2 (D5G2) XP® Rabbit mAb 5843 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
VGLUT2 (D7D2H) Rabbit mAb 71555 20 µl 65-70 kDa Rabbit IgG
VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 47181 20 µl 62 kDa Rabbit IgG
ChAT (E4F9G) Rabbit mAb 27269 20 µl 71 kDa Rabbit IgG
GAD1 (D1F2M) Rabbit mAb 41318 20 µl 67 kDa Rabbit IgG
5-HTR4 (D8O5K) Rabbit mAb 13690 20 µl 40-140 kDa Rabbit IgG
β2-Adrenergic Receptor (D6H2) Rabbit mAb 8513 20 µl 50-100 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting markers that facilitate phenotyping neurons by function. The kit includes enough antibodies to perform at least two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/mL BSA, 50% glycerol, and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

Tyrosine hydroxylase (TH) catalyzes the rate-limiting step in the synthesis of the neurotransmitter dopamine and other catecholamines, and acts as a marker for dopaminergic neurons (1,2). Choline O-acetyltransferase (ChAT) is the enzyme that catalyzes synthesis of acetylcholine (ACh) in the central and peripheral nervous system. ChAT is found in high levels within cholinergic neurons and can be used to measure their functional states (3). Vesicular glutamate transporters 1 and 2 (VGLUT1 and VGLUT2) are responsible for transporting the excitatory neurotransmitter glutamate into synaptic vesicles of glutamatergic neurons. VGLUT1 and VGLUT2 are complimentarily expressed and act as markers for glutamatergic neurons (4). Glutamate decarboxylase (GAD) is the main enzyme that synthesizes GABA from glutamate. GABA producing neurons, called GABAergic neurons, utilize GABA as their major inhibitory neurotransmitter with both isoforms of GAD, GAD1, and GAD2, acting as functional markers for these neurons (5). β2-adrenergic receptor (β2AR) is a G protein-coupled receptor (GPCR) that mediates the actions of catecholamines, mainly through stimulation by epinephrine (adrenaline), in the central and peripheral nervous system (6,7). Serotonin receptor 4 (5-HTR4) is an excitatory GPCR that activates the cyclic AMP (cAMP)-PKA pathway (8,9). 5-HTR4 is located post-synaptically on serotonergic neurons (10).

  1. Kumer, S.C. and Vrana, K.E. (1996) J Neurochem 67, 443-62.
  2. Weihe, E. et al. Cell Mol Neurobiol 26, 659-78.
  3. Oda, Y. (1999) Pathol Int 49, 921-37.
  4. Ziegler, D.R. et al. (2002) J Comp Neurol 448, 217-29.
  5. Le, T.N. et al. (2017) J Neurosci 37, 8816-8829.
  6. Wu, Y. et al. (2021) Biomolecules 11, 936. doi: 10.3390/biom11070936.
  7. Wallukat, G. (2002) Herz 27, 683-90.
  8. Nichols, D.E. and Nichols, C.D. (2008) Chem Rev 108, 1614-41.
  9. Karayol, R. et al. (2021) Mol Psychiatry 26, 2334-2349.
  10. Samuels, B.A. et al. (2016) Neuroscientist 22, 26-45.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    Revision 4
    #48510

    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit

    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 5-HTR4 (D8O5K) Rabbit mAb 对转染空载的 (-) 或转染带 Myc/DDK 标签的全长人 5-HTR4 (h5-HTR4-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 ChAT (E4F9G) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对人脊髓、小鼠脊髓和小鼠肾脏细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 GAD1 (D1F2M) Rabbit mAb(上图)和 B-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对小鼠和大鼠组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    对使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb(左图,绿色)、β3-Tubulin (E9F3E) Mouse mAb #45058(右图,红色)和 ProLong Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(右图,蓝色)标记的固定冷冻的小鼠小脑进行共聚焦组织免疫荧光分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对来自各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。VGLUT1 蛋白在大鼠肺脏组织中低表达与预测的表达模式一致。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠嗅球组织进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 GAD2 (D5G2) XP® Rabbit mAb,对新生小鼠脑和胎大鼠脑提取物进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体(上图)和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对各种组织和细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 VGLUT2 (D7D2H) Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb # 8457(下图)对小鼠脑、小鼠肺、大鼠脑和人皮质细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 β2-Adrenergic Receptor (D6H2) Rabbit mAb,对细胞进行蛋白质印迹法分析,这些细胞为转染空载(-)或使用编码人 β2 肾上腺素能受体 (hβ2AR) 的 cDNA 表达构建体转染(+)的 ACHN 细胞或 293T 细胞。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 5-HTR4 (D8O5K) Rabbit mAb 对 NIH/3T3 和 PC-12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    对小鼠脑组织提取物的 GAD1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 GAD1 (D1F2M) Rabbit mAb。使用 GAD1 (D1F2M) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb(左图,绿色)、β3-Tubulin (E9F3E) Mouse mAb #45058(右图,红色)和 ProLong Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(右图,蓝色)对固定冷冻的小鼠海马进行共聚焦免疫荧光分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠皮质组织进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 GAD2 (D5G2) XP® Rabbit mAb(绿色)时,对小鼠脑进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(荧光 DNA 标准品)。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右图)作为对照,使用 Tyrosine Hydroxylase (E2L6M) Rabbit mAb(左图)对石蜡包埋的小鼠脑进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    对小鼠脑细胞提取物 VGLUT2 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 VGLUT2 (D7D2H) Rabbit mAb。使用 VGLUT2 (D7D2H) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 GAD1 (D1F2M) Rabbit mAb(绿色)和 GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #3656(红色)对大鼠视网膜(左图)和小脑(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠眼组织进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 PC-12 细胞沉淀物(左图,阳性)或 KNRK 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 对以下各种石蜡包埋的正常人组织进行免疫组织化学分析:大脑(左上图)、扁桃体(中上图)、小肠(右上图)、皮肤(左下图)、睾丸(中下图)和脾脏(右下图)。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb(上图)或 VGLUT1 Antibody(下图)对石蜡包埋的人正常脑组织(左图)、小鼠小脑组织(中图)或小鼠齿状回组织(右图)进行免疫组织化学分析。这两种抗体可检测 VGLUT1 蛋白上独特的非重叠表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的大鼠小肠细胞进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    与浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(右图)比较,使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb(左图)对石蜡包埋的小鼠小脑组织进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 Tyrosine Hydroxylase (E2L6M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 VGLUT1 (E8L5B) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 293T 细胞沉淀物、小鼠未转染(左图)或已转染的 VGLUT1(右图)进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 Tyrosine Hydroxylase (E2L6M) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠进行免疫组织化学分析。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体(绿色)和 Neurofilament-L (DA2) 小鼠单克隆抗体 #2835(红色)对大鼠纹状体进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用酪氨酸羟化酶 (E2L6M) 兔单克隆抗体(绿色)对 HCC1419 细胞(左图,阳性)和 ACHN 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。蓝色= Hoechst 33342 #4082(DNA 荧光染料)。
    Functional Neuron Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Tyrosine Hydroxylase (E2L6M) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 KNRK 细胞(蓝色,阴性)和 PC-12 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。