Revision 1

#9330Store at -20C

1 个试剂盒

(4 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Phospho-FAK (Tyr576/577) Antibody 3281 20 µl 125 kDa Rabbit 
Phospho-FAK (Tyr925) Antibody 3284 20 µl 125 kDa Rabbit 
Phospho-FAK (Tyr397) (D20B1) Rabbit mAb 8556 20 µl 125 kDa Rabbit IgG
FAK (D2R2E) Rabbit mAb 13009 20 µl 125 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The FAK Antibody Sampler Kit provides an economical means of evaluating total FAK protein levels as well as FAK phosphorylated at specific sites. The kit contains enough primary and secondary antibody to perform two western blots with each antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Focal adhesion kinase (FAK) is a widely expressed cytoplasmic protein tyrosine kinase involved in integrin-mediated signal transduction. It plays an important role in the control of several biological processes, including cell spreading, migration, and survival (1). Activation of FAK by integrin clustering leads to autophosphorylation at Tyr397, which is a binding site for the Src family kinases PI3K and PLCγ (2-5). Recruitment of Src family kinases results in the phosphorylation of Tyr407, Tyr576, and Tyr577 in the catalytic domain, and Tyr871 and Tyr925 in the carboxy-terminal region of FAK (6,7).

  1. Parsons, J.T. et al. (2000) Oncogene 19, 5606-13.
  2. Schaller, M.D. et al. (1994) Mol Cell Biol 14, 1680-8.
  3. Cobb, B.S. et al. (1994) Mol Cell Biol 14, 147-55.
  4. Chen, H.C. et al. (1996) J Biol Chem 271, 26329-34.
  5. Zhang, X. et al. (1999) Proc Natl Acad Sci U S A 96, 9021-6.
  6. Calalb, M.B. et al. (1995) Mol Cell Biol 15, 954-63.
  7. Schlaepfer, D.D. et al. (1994) Nature 372, 786-791.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    Revision 1
    #9330

    FAK Antibody Sampler Kit

    FAK Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 FAK (D2R2E) Rabbit mAb #13009 对 3T3 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-FAK (Tyr397) (D20B1) Rabbit mAb #8556 对来自 A-549 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 FAK (D2R2E) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Phospho-FAK (Tyr576/577) Antibody(上)或 FAK antibody(下)对未经或经 anti-CD3 抗体(1 µg/ml,10分钟)处理的 Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 Phospho-FAK (Tyr925) Antibody(上)或 FAK antibody(下)对未经或经 anti-CD3 抗体(1 µg/ml,10分钟)处理的 Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-FAK (Tyr397) (D20B1) Rabbit mAb(上)和 FAK Antibody #3285(下)对未经或经小牛肠道磷酸酶 (CIP) 处理的 A549细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    FAK Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道2)或 FAK (D2R2E) Rabbit mAb(泳道3)对 U-87 MG 细胞提取物进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 FAK (D2R2E) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。