Revision 5

#14069Store at -20C

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, IP, IF-IC, ChIP, ChIP-seq, C&R

REACTIVITY:

H M R

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

52

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P14921

Entrez-Gene Id:

2113

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP and ChIP-seq results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

The CUT&RUN dilution was determined using CUT&RUN Assay Kit #86652.
Application Dilution
Western Blotting 1:2000
Immunoprecipitation 1:50
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:3200 - 1:6400
Chromatin IP 1:50
Chromatin IP-seq 1:50
CUT&RUN 1:50

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Specificity / Sensitivity

ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb recognizes endogenous levels of total ETS-1 protein.

Species Reactivity:

Human, Mouse, Rat

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with a synthetic peptide corresponding to residues surrounding Ser179 of human ETS-1 protein.

Background

ETS-1 is a proto-oncoprotein that belongs to the E26 Transformation-specific Sequence (ETS) family of transcription factors that share a unique and highly conserved DNA binding domain (1). ETS-1 plays important roles in vascular development and angiogenesis (2), and vascular inflammation and remodeling (3). The target genes of ETS-1 include receptor tyrosine kinases, MMPs, and cell adhesion molecules (4-6). In addition, ETS-1 is involved in regulation of energy metabolism in cancer cells (7). ETS-1 activity is regulated by two different types of phosphorylation sites. While phosphorylation at a cluster of serine residues in the exon VII domain by CaMKII inhibits ETS-1 DNA binding activity (8), phosphorylation at its Thr38 site by Ras activates ETS-1 (9).

  1. Bartel, F.O. et al. (2000) Oncogene 19, 6443-54.
  2. Sato, Y. (2001) Cell Struct Funct 26, 19-24.
  3. Oettgen, P. (2006) Circ Res 99, 1159-66.
  4. Dube, A. et al. (1999) Circ Res 84, 1177-85.
  5. Lelièvre, E. et al. (2000) Oncogene 19, 2438-46.
  6. Ghosh, S. et al. (2012) J Biol Chem 287, 15001-15.
  7. Verschoor, M.L. et al. (2010) PLoS One 5, e13565.
  8. Pognonec, P. et al. (1988) EMBO J 7, 977-83.
  9. Yang, B.S. et al. (1996) Mol Cell Biol 16, 538-47.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v BSA, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting IP: Immunoprecipitation IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) ChIP: Chromatin IP ChIP-seq: Chromatin IP-seq C&R: CUT&RUN

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
SimpleChIP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Revision 5
#14069

ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物的蛋白质印迹分析。
Immunoprecipitation Image 1: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb（泳道 3）对来自 OVCAR8 细胞提取物的 ETS-1 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
Immunofluorescence Image 1: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb（绿色）对 OVCAR8 细胞（高表达，左）、A549 细胞（中度表达，中间) 和 HeLa（低表达，右）细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DyLight™ 554 phalloidin #13054（红色）标记。
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法）#9005 对 K-562 细胞的交联染色质和 ETS-1 (D8O8A) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。
Chromatin Immunoprecipitation Image 2: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒（磁珠法）#9005 对 K-562 细胞的交联染色质和 ETS-1 (D8O8A) 兔单克隆抗体 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 1（上图）内的结合，包括 RNF187（下图）。
Chromatin Immunoprecipitation Image 3: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human c-Fos Promoter Primers #4663 、human c-Myc intron 1 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
CUT and RUN Image 1: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 K-562 细胞和 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 ETS-1 的已知靶基因 ATXN7L3 内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
CUT and RUN Image 2: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 K-562 细胞和 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。‚使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在染色体 17（上图）内的结合，包括 ETS-1 的已知靶标基因 ATXN7L3（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
CUT and RUN Image 3: ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对经过 β-estradiol (10 nM) 处理 45 分钟的 K-562 细胞和 ETS-1 (D8O8A) Rabbit mAb or Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用 human ATXN7L3 promoter primers、human TMEM53 exon 1 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
图像库
更多了解我们如何获得图像
Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
仅供研究使用。不得用于诊断流程。