Revision 1

#12666Store at -20C

1 个试剂盒

(6 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 3267 20 µl 21, 24 kDa Rabbit IgG
Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb 4796 20 µl 190 kDa Rabbit IgG
EEA1 (C45B10) Rabbit mAb 3288 20 µl 170 kDa Rabbit IgG
Rab5A (E6N8S) Mouse mAb 46449 20 µl 25 kDa Mouse IgG1
Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb 9367 20 µl 23 kDa Rabbit IgG
Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb 5589 20 µl 25 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Endosomal Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means of distinguishing endosomes in the early, late, and recycling phases. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Endosomes are formed by the invagination of the plasma membrane to form vesicles in an effort to recycle components of the cell (1). Endosomes can be coated in clathrin when vesicles form at clathrin-coated pits (2). Caveolins are 21-24 kDa integral proteins that interact with cholesterol and are the main structural components of the cholesterol/sphingolipid-enriched plasma membrane caveolae (3). Each stage of endosome maturation is marked by a unique set of proteins. EEA1 is an early endosome marker that is essential for membrane fusion and trafficking (4). Members of the ras superfamily of small Rab GTPases, specifically Rab5, Rab7, and Rab11 are markers of the early, late and recycling endosomes (5).

  1. Huotari, J. and Helenius, A. (2011) EMBO J 30, 3481-500.
  2. Rodriguez-Boulan, E. et al. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol 6, 233-47.
  3. Okamoto, T. et al. (1998) J Biol Chem 273, 5419-22.
  4. Christoforidis, S. et al. (1999) Nature 397, 621-5.
  5. Zerial, M. and McBride, H. (2001) Nat Rev Mol Cell Biol 2, 107-17.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #12666

    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit

    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠脾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠肾脏组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    对使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（左图，红色）标记并使用 DyLight™ 488 Phalloidin #12935（右图，绿色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共标记的固定的冷冻小鼠骨骼肌组织进行共聚焦免疫荧光分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对不同细胞类型提取物进行蛋白质印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288（绿色）、GFAP (GA5) Mouse mAb #3670（红色）和 DAPI #4083（蓝色）对阿尔茨海默病淀粉样蛋白小鼠模型中的固定冷冻的大脑进行共聚焦免疫荧光图块扫描。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    对使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288（左图，绿色）标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670（右图，红色）和 DAPI #4083（右图，蓝色）共同标记的固定冷冻的小鼠丘脑进行共聚焦免疫荧光分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    对使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb #3288（左图，绿色）标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670（右图，红色）和 DAPI #4093（右图，蓝色）共同标记的固定冷冻的小鼠海马体进行共聚焦免疫荧光分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*，它可在酶催化的分解期间发光。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb #3267（上图）或 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对对照 HeLa 细胞（泳道 1）或 Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞（泳道 2）的提取物进行蛋白质印迹分析。Caveolin-1 敲除型 HeLa 细胞中没有信号，这证实了抗体对Caveolin-1 的特异性。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 EEA1 (C45B10) Rabbit mAb（绿色）对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。蓝色伪彩 = DRAQ5™ （DNA 荧光染料）。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    Western blot analysis of HAP1 extracts from WT (left) or RAB5A KO (right) using Rab5A (E6N8S) Mouse mAb. 用 Ponceau S 染色的膜进行总蛋白标准化（下图）。这些数据由 YCharOS Inc. 提供，该公司是一家开放科学公司，作为 CST 科学家生成的验证数据的合作伙伴，其使命是表征市售抗体。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 Clathrin Heavy Chain (D3C6) XP® Rabbit mAb（绿色）对 SH-SY5Y 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 Rab11 (D4F5) XP® Rabbit mAb（绿色） 对 A549 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 Rab7 (D95F2) XP® Rabbit mAb（绿色） 对 SK-MEL-28 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对 HeLa 细胞中提取的 caveolin-1 进行免疫沉淀，之后再使用相同的抗体进行蛋白质印迹分析。泳道 1 是 5% 输入对照。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物 Rab5A 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415，泳道 3 为不含 HeLa 细胞提取物的 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体，泳道 4 为 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体。使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体进行蛋白印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物 Rab5A 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control #5415，泳道 3 为 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体。使用 Rab5 (C8B1) 兔单克隆抗体 #3547 进行蛋白印迹分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺导管癌进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢浆液性乳头状癌进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（绿色）对 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记（红色）。蓝色伪彩 = DRAQ5®（DNA 荧光染料）。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    以浓度匹配的 Mouse (G3A1) IgG1 Isotype Control #5415（右图）作为对照，使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体（左图）对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Caveolin-1 (D46G3) XP® Rabbit mAb（实线）对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体对石蜡包埋的人前列腺腺癌进行免疫组织化学分析。
    Endosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Rab5A (E6N8S) 小鼠单克隆抗体（绿色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
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