Revision 3

#33437Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb 54376 20 µl 55 kDa Rabbit IgG
MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 40994 20 µl 64,72 kDa Rabbit IgG
MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 13667 20 µl 84, 92 kDa Rabbit IgG
MMP-13 (E4W3T) Rabbit mAb 69926 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 26836 20 µl 300 kDa Rabbit IgG
MMP-3 (D7F5B) Rabbit mAb 14351 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
LOX (D8F2K) Rabbit mAb 58135 20 µl 54, 56 kDa Rabbit IgG
COL11A1 (E6O7R) Rabbit mAb 70458 20 µl 250 kDa Rabbit IgG
COL1A1 (E6A8E) Rabbit mAb 39952 20 µl 220 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The ECM Profiling Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting endogenous levels of the specific ECM components using the corresponding antibodies. The kit includes enough antibodies to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

The extracellular matrix (ECM) is a cell surface associated three-dimensional macromolecular network composed of collagens, proteoglycans/glycosaminoglycans, elastin, fibronectin, laminins, and several other glycoproteins (1). The network provides a dynamic microenvironment surrounding the cell enabling it to carry on its function. Among the ECM proteins, fibronectin functions as a mediator to bridge distinct ECM components such as collagens, growth factors, as well as cell surface integrins to regulate ECM structural change and initiate signaling pathways (2). During normal development and pathological conditions, the ECM network is highly dynamic and continuously undergoes remodeling marked by the change of the ECM structural components, such as COL1A1, COL11A1, fibronectin, and versican. The matrix-degrading enzyme MMPs such as MMP1, MMP2, and MMP9 are highly involved in this process (4). Additional players in this process are the LOX family members of lysyl oxidase. They catalyze the first step of the covalent cross-linking of ECM proteins, collagens, and elastin, which contributes to ECM stiffness and mechanical properties (5).

  1. Theocharis, A.D. et al. (2019) FEBS J 286, 2830-69.
  2. Zollinger, A.J. and Smith, M.L. (2017) Matrix Biol 60-1, 27-37.
  3. Paolillo, M. and Schinelli, S. (2019) Int J Mol Sci 20, pii: E4947. doi: 10.3390/ijms20194947.
  4. Bonnans, C. et al. (2014) Nat Rev Mol Cell Biol 15, 786-801.
  5. Amendola, P.G. et al. (2019) Cancers (Basel) 11, pii: E729. doi: 10.3390/cancers11050729.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 3
    #33437

    ECM Profiling Antibody Sampler Kit

    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 SCaBER 细胞沉淀物（左图，阳性）或 HT-29 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb（上图）或 MMP-1 Rabbit mAb（下图）对石蜡包埋的人导管乳腺癌组织（左图）、肺腺癌组织（中图）或鳞状细胞肺癌组织（右图）进行免疫组织化学分析。这两种抗体可检测人 MMP-1 上独特的非重叠表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人食管癌组织进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb（绿色）、DyLight 650 Phalloidin #12956（红色）和 DAPI #4083（蓝色）对 SCaBER 细胞（左图，阳性）或 HT-29 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb ，对未处理的 (-) 或已经过 TPA #4174 (200 nM，48 hr；+) 处理的 U-2 OS 细胞的浓缩、无血清培养基进行蛋白质印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 MMP-3 (D7F5B) 兔单抗对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。PANC-1 细胞提取物中缺失纤连蛋白/FN1 表达与分子和蛋白质组表达谱数据一致，证实了该抗体的特异性。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 COL1A1 (E6A8E) 兔单克隆抗体（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 MMP-1 (E9S9N) 兔单克隆抗体（上图）和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 LOX (D8F2K) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 MMP-13 (E4W3T) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 COL11A1 (E6O7R) Rabbit mAb（上图）或

    β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。如所预期的一样，与所示的其他细胞系相比，A-204 细胞具有更高水平的 COL11A1 表达。

    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对未经处理 (-) 或已经过 TPA #4174（200 nM，48 小时；+）处理的 U-2 OS 细胞的提取物和浓缩培养基进行蛋白质印迹法分析。正如预期的那样，MMP-9 是由 TPA 处理诱导的。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    对 Hep G2 细胞提取物纤连蛋白/FN1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb。使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    对 SK-N-SH 细胞提取物 COL1A1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 COL1A1 (E6A8E) 兔单克隆抗体。使用 COL1A1 (E6A8E) 兔单克隆抗体进行蛋白印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。

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    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    对 U-118MG 细胞提取物的 MMP-2 蛋白质进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入，泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，而泳道 3 是 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb。使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 作为一抗，进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    对 SCaBER 细胞提取物 MMP-1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10%输入，泳道 2 为兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900，泳道 3 为 MMP-1 (E9S9N) 兔单克隆抗体。使用 MMP-1 (E9S9N) 兔单克隆抗体进行蛋白印迹分析。抗兔 IgG (特定轻链), HRP-偶联抗体用作二抗。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（右图）作为对照，使用 MMP-1 (E9S9N) Rabbit mAb（左图）对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌组织进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    在 Leica® BOND™ Rx 上使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺神经内分泌癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 COL1A1 (E6A8E) 兔单克隆抗体（绿色）对 U-118 MG 细胞（左图，阳性）和 HT-29 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结膀胱癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Hep G2 细胞沉淀物（左图，阳性）或 PANC-1 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 U-87 MG 细胞沉淀物（左图，阳性）或 HCT-15 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对未处理的（左）或已经过 TPA #4174（右）处理的石蜡包埋的 U-2 OS 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人宫颈癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人尿路上皮癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb（左图）或 Fibronectin Rabbit mAb（右图）对石蜡包埋的人气管腺样囊性癌细胞进行免疫组织化学分析。这两种抗体可检测人纤连蛋白/FN1 蛋白上的独立、独特表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 MMP-2 (D4M2N) Rabbit mAb（绿色）对 U-87MG细胞（左图，阳性）和 HCT-15 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经处理（蓝色）或经过 TPA (12-O-Tetradecanoylphorbol-13-Acetate) #4174（200 nM，24 小时；蓝色）或处理的 U-2 OS 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（右图）作为对照，使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb（左图）对石蜡包埋的人结肠腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 B 细胞非霍奇金氏淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
    ECM Profiling Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 Fibronectin/FN1 (E5H6X) Rabbit mAb（绿色）对 U-118 MG 细胞（左图，阳性）和 PANC-1 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 650 Phalloidin #12956（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
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