Revision 1

#65816Store at -20C

1 个试剂盒

(3 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 34589 20 µl 62 kDa Rabbit IgG
HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb 57156 20 µl 60 kDa Rabbit IgG
HDAC3 (D2O1K) Rabbit mAb 85057 20 µl 49 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

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Description

The Class I HDAC Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting Class I HDAC proteins using control antibodies against HDAC1, HDAC2 and HDAC3. The kit contains enough primary antibodies to perform at least two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Acetylation of the histone tail causes chromatin to adopt an "open" conformation, allowing increased accessibility of transcription factors to DNA. The identification of histone acetyltransferases (HATs) and their large multiprotein complexes has yielded important insights into how these enzymes regulate transcription (1,2). HAT complexes interact with sequence-specific activator proteins to target specific genes. In addition to histones, HATs can acetylate nonhistone proteins, suggesting multiple roles for these enzymes (3). In contrast, histone deacetylation promotes a "closed" chromatin conformation and typically leads to repression of gene activity (4). Mammalian histone deacetylases can be divided into three classes on the basis of their similarity to various yeast deacetylases (5). Class I proteins (HDACs 1, 2, 3, and 8) are related to the yeast Rpd3-like proteins, those in class II (HDACs 4, 5, 6, 7, 9, and 10) are related to yeast Hda1-like proteins, and class III proteins are related to the yeast protein Sir2. Inhibitors of HDAC activity are now being explored as potential therapeutic cancer agents (6,7).

  1. Marmorstein, R. (2001) Cell Mol Life Sci 58, 693-703.
  2. Gregory, P.D. et al. (2001) Exp Cell Res 265, 195-202.
  3. Liu, Y. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 5540-53.
  4. Cress, W.D. and Seto, E. (2000) J Cell Physiol 184, 1-16.
  5. Gray, S.G. and Ekström, T.J. (2001) Exp Cell Res 262, 75-83.
  6. Thiagalingam, S. et al. (2003) Ann. N.Y. Acad. Sci. 983, 84-100.
  7. Vigushin, D.M. and Coombes, R.C. (2004) Curr Cancer Drug Targets 4, 205-18.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #65816

    Class I HDAC Antibody Sampler Kit

    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，以 K562 细胞和 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 或 G9a/EHMT2 (D5R4R) XP® Rabbit mAb #68851 进行 CUT&RUN 。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示结合作用遍及 CTPS1 —— HDAC1 和 G9a 的已知靶标基因（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb，对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 HDAC3 (D2O1K) Rabbit mAb，对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物的 HDAC1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，而泳道 3 为 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb。使用 HDAC1 (D5C6U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，以 K562 细胞和 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 或 G9a/EHMT2 (D5R4R) XP® Rabbit mAb #68851 进行 CUT&RUN 。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示结合作用遍及 1 号染色体（上图），包括 HDAC1 和 G9a 的已知靶标基因 CTPS1（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物 HDAC2 进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% 输入，泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 是 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb。使用 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb进行蛋白质印迹分析。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经三苯氧胺（100 nM，45 分钟）处理的 MCF7 细胞的交联染色质与 HDAC3 (D2O1K) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 TFF1/pS2 内结合，TFF1/pS2 是一种已知的 HDAC3 的靶标基因（参见含有 ChIP-qPCR 数据的其他图形）。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 HDAC1 (D5C6U) Rabbit mAb（绿色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652， 以K562 细胞和 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用人 CTPS1 启动子引物、人 ELP6 启动子引物和人 IQCF 内含子 2 引物，通过实时 PCR 对富集的 DNA 定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb（绿色）对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经三苯氧胺（100 nM，45 分钟）处理的 MCF7 细胞的交联染色质与 HDAC3 (D2O1K) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在染色体 21（上图）内的结合，包括 HDAC3 的已知靶标基因 TFF1/pS2（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb #57156 或 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。HDAC2 和 HDAC1 已知在染色质上的结合形式相似。结果图显示 HDAC2 和 HDAC1 在 ACVR1 基因内的结合。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb 或 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb #34589 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。HDAC2 和 HDAC1 已知在染色质上的结合形式相似。结果图显示 HDAC2 和 HDAC1 在 ACVR1 基因内的结合。如需了解其他 ChIP-seq 情况，请下载产品说明书。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对经三苯氧胺（100 nM，45 分钟）处理的 MCF7 细胞的交联染色质与 HDAC3 (D2O1K) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702、SimpleChIP® Human c-Myc Intron 1 Primers #14905、human c-Myc promoter primers 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb #57156 或 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。HDAC2 和 HDAC1 已知在染色质上的结合形式相似。结果图显示在染色体 2（上图）内 HDAC2 和 HDAC1 两者的结合，包括 ACVR1 基因（下图）。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb 或 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb #34589 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。HDAC2 和 HDAC1 已知在染色质上的结合形式相似。结果图显示在染色体 2（上图）内 HDAC2 和 HDAC1 两者的结合，包括 ACVR1 基因（下图）。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 K-562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516 和 SimpleChIP® Human Nanog Promoter Primers #95064 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Class I HDAC Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003，对 K562 细胞中提取的交联染色质，在加入 HDAC2 (D6S5P) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、human BCR exon 1 primers 和 SimpleChIP® Human Nanog Promoter Primers #95064，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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