Revision 1

#9868Store at -20C

1 个试剂盒

(6 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
cdc2 (POH1) Mouse mAb 9116 20 µl 34 kDa Mouse IgG2a
CDK2 (78B2) Rabbit mAb 2546 20 µl 33 kDa Rabbit 
CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb 12790 20 µl 30 kDa Rabbit IgG
CDK6 (D4S8S) Rabbit mAb 13331 20 µl 36 kDa Rabbit IgG
CDK7 (MO1) Mouse mAb 2916 20 µl 40 kDa Mouse IgG2b
CDK9 (C12F7) Rabbit mAb 2316 20 µl 42, 55 kDa Rabbit 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 
Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody 7076 100 µl Horse 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The CDK Antbody Sampler Kit provides and economical means of evaluating Cdk proteins. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Cyclin-dependent kinases (CDKs) are the core effectors of cell cycle progression. CDK activity is regulated through association with their cyclin partners and cyclin-dependent kinase inhibitors (CKIs) as well as by activating and inhibitory phosphorylation events. Inhibition is mediated by Wee1 and Myt1 kinases that target residues at the amino terminus of CDK1 (1,2). Dephosphorylation of these residues by cdc25 phosphatase leads to activation of CDK kinase activity (3). The CDK7/cyclinH complex is the ubiquitous mammalian CDK-activating kinase (CAK) that phosphorylates a conserved threonine residue in the T-loop domain of CDKs. The carboxy-terminal domain of RNA polymerase II is also a target of CAK as well as CDK9/cyclinT (4,5). CDK4/6 associate with cyclinD and phosphorylate retinoblastoma protein and initiate progression through the restriction point in G1 (6). CDK2 associates with cyclinE in early S phase and cyclinA later in G2. CDK1/cyclinB regulates the initiation of mitotic events (7).

  1. Fattaey, A. and Booher, R.N. (1997) Prog Cell Cycle Res 3, 233-40.
  2. Booher, R.N. et al. (1997) J Biol Chem 272, 22300-6.
  3. Jessus, C. and Ozon, R. (1995) Prog Cell Cycle Res 1, 215-28.
  4. Kaldis, P. (1999) Cell Mol Life Sci 55, 284-96.
  5. De Falco, G. and Giordano, A. Cancer Biol Ther 1, 342-7.
  6. Sherr, C.J. (1995) Trends Biochem Sci 20, 187-90.
  7. Morgan, D.O. (1997) Annu Rev Cell Dev Biol 13, 261-91.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

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    Revision 1
    #9868

    CDK Antibody Sampler Kit

    CDK Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 CDK6 (D4S8S) Rabbit mAb #13331 对 COS-7 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 CDK6 (D4S8S) Rabbit mAb(绿色)、DyLight 650 Phalloidin #12956(红色)和 DAPI #4083(蓝色)对 T98G 细胞(左图,阳性)或 VCaP 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Enhanced cross-linking and immunoprecipitation (eCLIP) was performed with RNA from Hep G2 cells and CDK9 (C12F7) Rabbit mAb using a protocol based on the RBP-eCLIP method from Eclipsebio. The figure shows binding across the PUM2 transcript. 数据由 Gene Yeo 博士的实验室友情提供,并经许可使用。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 CDK2 (78B2) Rabbit mAb #2546 对 HeLa 细胞的裂解物 (1.0 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    对 Hela 细胞提取物中的 CDK7 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Mouse (E7Q5L) mAb IgG2b Isotype Control #53484,泳道 3 为 CDK7 (MO1) Mouse mAb。使用 CDK7 (E4K4W) Rabbit mAb #42863 进行蛋白质印迹法分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 CDK6 (D4S8S) Rabbit mAb 对 HeLa、Jurkat 和 COS-7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 CDK2 (78B2) Rabbit mAb,对 HeLa、NIH/3T3、C6 和 COS 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 CDK7 (MO1) Mouse mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹法分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO*,它可在酶催化的分解期间发光。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 cdc2 (POH1) Mouse mAb 对细胞周期的不同阶段同步处理的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道2)或 CDK6 (D4S8S) Rabbit mAb(泳道3)对 HeLa 细胞提取物 CDK6 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 CDK6 (DCS83) Mouse mAb #3136进行蛋白质印迹分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb 对 HeLa 细胞的 CDK9 进行免疫沉淀。使用相同的抗体进行蛋白质印迹检测。泳道 1 是 5% 输入对照。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 CDK2 (78B2) Rabbit Mab (RIGHT) 和 Propidium Iodide (PI)/Rnase Staining Solution # 对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析4087,与仅次级样本(左图)相比较。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 CDK7 (MO1) Mouse mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析,显示其定位于胞核。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 cdc2 (POH1) Mouse mAb(绿色),对 SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568(左图)、SignalSilence® cdc2 siRNA I #3500(中图)或 SignalSilence® cdc2 siRNA II #3600(右图)转染的 HT-29 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    在对照肽(左图)或抗原特异性肽段(右图)存在的情况下,使用 CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb(绿色)、p21 Waf1/Cip1 (12D1) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #8493(红色)和 Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #3458(蓝色伪彩)对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 K7M2 小鼠同基因肿瘤进行免疫组织化学分析。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(左图)作为对照,使用 CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb(右图)和 Propidium Iodide (PI)/RNase Staining Solution #4087 对 Daudi 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝可用 DY-555 Phalloidin(红色)标记。
    CDK Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 CDK9 (C12F7) Rabbit mAb(实线)对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。