Revision 1

#9961Store at -20C

1 个试剂盒

(6 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
α-E-Catenin (23B2) Rabbit mAb 3240 20 µl 100 kDa Rabbit IgG
N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 13116 20 µl 140 kDa Rabbit IgG
E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 3195 20 µl 135 kDa Rabbit IgG
P-Cadherin (C13F9) Rabbit mAb 2189 20 µl 120 kDa Rabbit IgG
Pan-Cadherin (28E12) Rabbit mAb 4073 20 µl 130-150 kDa Rabbit IgG
β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 8480 20 µl 92 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

This Cadherin-Catenin Antibody Sampler kit contains reagents to examine the total protein levels of key proteins found in cell-cell adherens junctions. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two Western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Adherens junctions are dynamic structures that form cell-cell contacts and are important in development, differentiation, tissue integrity, morphology and cell polarity. They are composed of cadherins that are transmembrane proteins that bind cadherins on adjacent cells in a calcium dependent manner. On the cytoplasmic side of adherens junctions, the cadherins associate with β-catenin, γ-catenin and p120 catenin (δ). β-catenin and γ-catenin associate with α-catenin, which links the cadherin-catenin complex to the actin cytoskeleton (1,2). Recent studies indicate that cancer cells exhibit increased N-cadherin and diminished E-cadherin expression. E-cadherin is considered a suppressor of invasive cancer cell growth and this change in cadherin expression associated with cancer progression is termed the “cadherin switch”. β-catenin is one of the key downstream effectors in the Wnt signaling pathway and has been implicated in early embryonic development and tumorigenesis (3-5).

  1. Wheelock, M.J. and Johnson, K.R. (2003) Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 19, 207-235.
  2. Christofori, G. (2003) EMBO J. 22, 2318-2323.
  3. Cadigan, K.M. and Nusse, R. (1997) Genes Dev. 11, 3286-3305.
  4. Wodarz, A. and Nusse, R. (1998) Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 14, 59-88.
  5. Polakis, P. (1999) Curr. Opin. Genet. Dev. 9, 15-21.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #9961

    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit

    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb #3195 对 MCF-7 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物中的 β-Catenin 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 进行沉淀,泳道 3 为 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb #8480。使用 β-Catenin (15B8) Mouse mAb #37477 进行蛋白质印迹法分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb #8480 对 HeLa 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对 A172 和 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 P-Cadherin (C13F9) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 α-E-Catenin (23B2) Rabbit mAb 对 HUVEC、NIH/3T3、MCF-7、ZR-75 和 A431 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Pan-Cadherin (28E12) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb #8480(上图)或 β-actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照 HeLa 细胞(泳道 1)或 β-Catenin编码基因出现明显框内截短突变的 HeLa 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白印迹分析。突变 HeLa 细胞中 β-Catenin分子量的变化与框内缺失一致。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HCT 116 细胞和 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在 β-Catenin 的已知靶基因 Axin2 内的结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金氏淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 P-Cadherin (C13F9) Rabbit mAb(绿色)对 A431 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    在 Leica BOND Rx 上使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳头状甲状腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 HCT 116 细胞和 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了在染色体 17(上图)内的结合,包括 β-Catenin 的已知靶标基因 Axin2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢颗粒细胞瘤进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,对 HCT 116 细胞和 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 分析。使用 SimpleChIP ® Human Axin2 Intron 1 Primers #8973、SimpleChIP® Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上,使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢浆液性乳头状癌组织进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    在 Leica® BOND Rx 上使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胃癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴结转移性腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb对石蜡包埋的人结肠腺癌进行免疫组织化学分析。

    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠细胞进行免疫组织化学分析。注意肠肌丛的染色。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胰腺进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 ß-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb对石蜡包埋的人结肠腺癌进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 A172(阳性,左图)和 MCF7(阴性,右图)细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用与同型对照物作对比的 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb(绿色,左图)对照(右图),对 MCF7 细胞进行共聚焦免疫荧光图像分析。蓝色伪彩 = DRAQ5®(DNA 荧光染料)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠小肠进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 N-Cadherin (D4R1H) XP® Rabbit mAb(绿色)对 A172(阳性,左图)和 MCF7(阴性,右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠胃进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)存在的情况下,使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    在对照肽(左图)或 E-Cadherin Blocking Peptide #1050(右图)存在的情况下,使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 E-Cadherin (24E10) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 Jurkat 细胞(蓝色,阴性)和 MCF7 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')₂ Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa(左图)或 NCI-H28(右图)细胞团进行免疫组织化学分析。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb(绿色)对小鼠结肠进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb(绿色)对 HeLa(左图)和 NCI-H28(右图)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit Isotype Control #3900(虚线)对 NCI-H28 细胞(绿色)和 Hela 细胞(蓝色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 HCT116 细胞中提取的交联染色质,在加入 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb #8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。本图显示整个 AXIN2(β-Catenin的一个已知靶基因)范围内的结合作用(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他图)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对 HCT116 细胞中提取的交联染色质,在加入 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Non-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb #8814 后进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 17(上图)内的结合,包括 β-Catenin 的已知靶标基因 AXIN2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
    Cadherin-Catenin Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 HCT 116 细胞的交联染色质,在加入 β-Catenin (D10A8) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后进行染色质免疫沉淀法分析。使用 SimpleChIP®Human Axin2 Intron 1 Primers #8973、SimpleChIP®Human CaMK2D Intron 3 Primers #5111、human c-Myc promoter primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。