Revision 1

#92516Store at -20C

1 个试剂盒

(9 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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Support: 877-678-TECH (8324)

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3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb 26387 20 µl 85 kDa Rabbit IgG
ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 13366 20 µl 35 kDa Rabbit IgG
PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb 3450 20 µl 95 kDa Rabbit IgG
Phospho-PSD95 (Ser295) (A8F8Z) Rabbit mAb 45737 20 µl 95 kDa Rabbit IgG
Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 5297 20 µl 77 kDa Rabbit IgG
AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb 13185 20 µl 100 kDa Rabbit IgG
Phospho-AMPA Receptor 1 (GluA1) (Ser831) (A5O2P) Rabbit mAb 75574 20 µl 100 kDa Rabbit IgG
CREB (48H2) Rabbit mAb 9197 20 µl 43 kDa Rabbit IgG
Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb 9198 20 µl 43 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting key synaptic signaling pathways in response to ApoE-mediated LRP1 activation by western blot. The kit includes enough antibodies to perform at least two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibodies.

Background

Low density lipoprotein receptor related protein 1 (LRP1) is a type I transmembrane receptor that mediates the endocytosis of various ligands, including apolipoproteins and tau. Both proteins are genetically and pathologically linked to Alzheimer’s disease (AD) (1,2). Human apolipoprotein E (ApoE) is a component of circulating lipoproteins when three human genetic ApoE variants, ApoE2, ApoE3, and ApoE4, exhibit distinct receptor-binding properties and differentially contribute to AD progression through a cellular mechanism that is poorly understood (2). Altered synaptic signaling is one proposed mechanism that contributes to altered neuronal function, which correlates with disease (3-5). Postsynaptic Density protein 95 (PSD95) is a member of the membrane-associated guanylate kinase (MAGUK) family of proteins that functions as a scaffolding protein to promote assembly and function of the postsynaptic density complex (6,7). At the presynapse, synapsins function to regulate neurotransmitter release (8,9). Dynamic phosphorylation of PSD95 at Ser295 reflects synaptic signaling that may alter synaptic function (10). In addition to PSD95, postsynaptic glutamate receptors, including AMPA-(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid) receptors, can be directly phosphorylated. Phosphorylation of AMPA Receptor 1 (GluA1) at either Ser831 or Ser845 alters AMPA receptor ion channel function to change synaptic efficacy (11). CREB is a bZIP transcription factor that activates target genes through cAMP response elements. CREB is activated by phosphorylation at Ser133 by various signaling pathways including Erk, Ca2+,stress signaling, as well as synaptic signaling (3). 

  1. Rauch, J.N. et al. (2020) Nature 580, 381-385.
  2. Corder, E.H. et al. (1993) Science 261, 921-3.
  3. Yong, S.M. et al. (2014) Sci Rep 4, 6580.
  4. Huang, Y.A. et al. (2019) J Neurosci 39, 7408-7427.
  5. Lane-Donovan, C. and Herz, J. (2017) Trends Endocrinol Metab 28, 273-284.
  6. Cao, J. et al. (2005) J Cell Biol 168, 117-26.
  7. Chetkovich, D.M. et al. (2002) J Neurosci 22, 6415-25.
  8. Greengard, P. Mol Neurobiol 1, 81-119.
  9. Hosaka, M. et al. (1999) Neuron 24, 377-87.
  10. Kim, M.J. et al. (2007) Neuron 56, 488-502.
  11. Lee, H.K. et al. (2000) Nature 405, 955-9.

Background References

    Trademarks and Patents

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    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #92516

    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit

    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    对使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb（上图，绿色）标记且来自 C57BL/6（左图）和 POE4 敲入型（hu/hu，模型 #1549-F，右图）小鼠的固定冷冻的海马组织进行共聚焦免疫荧光分析。将游离的二抗结合位点随后用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 阻断，之后用 GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 594 Conjugate) #8152（下图，红色）和 AQP4 (D1F8E) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #89851（下图，伪彩蓝色）进行共同标记。Taconic Biosciences, Inc. 的小鼠
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from mouse brain using PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb #3450. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 66-440 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    Simple WesternTM analysis of lysates (0.75 mg/mL) from Mouse Brain cells using Phospho-PSD95 (Ser295) (A8F8Z) Rabbit mAb #45737. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。This experiment was performed under reducing conditions on the JessTM Simple Western instrument from ProteinSimple, a BioTechne brand, using the 66-440 kDa separation module.
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    Simple Western™ analysis of lysates (0.1 mg/mL) from CAD cells using Synapsin-1 (D12G5) XP Rabbit mAb #5297. 虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用经 Forskolin # 3828 (30 μm) 处理 1 小时的 293 细胞以及 CREB (48H2) Rabbit mAb 或 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit Mab #9198，通过 CUT&RUN Assay Kit #86652 进行 CUT&RUN 分析。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® #56795 制成 DNA 库。结果图显示在 NR4A3 基因内结合。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb #9198 对经毛喉素处理（30uM，30 分钟）和 IBMX处理（0.5mM，30 分钟）的 SK-N-MC 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带（如图所示）。该抗体也检出磷酸化形式的 CREB 相关蛋白——ATF-1 （如所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:10（蓝线）和 1:50（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上还原条件下进行该实验。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb，对小鼠脑、大鼠脑和大鼠前额皮质组织的提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对经 Brefeldin A #9972（10 ng/ml，90 分钟）处理的 Hep G2 细胞和人类小脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肾脏进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb（上图）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下图）对不同细胞系和组织的提取物进行蛋白印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb 对人小脑和大鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Phospho-PSD95 (Ser295) (A8F8Z) Rabbit mAb（上图）或 PSD95 (D74D3) XP® Rabbit mAb #3409（下图），对未经处理 (-) 或已经 λ 磷酸酶 (+) 处理的小鼠脑细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对 CAD 细胞和新生小鼠脑组织提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 CREB (48H2) Rabbit mAb，对 SK-N-MC、COS、NIH/3T3、C6 和果蝇 S2 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb（上）或 CREB (48H2) Rabbit mAb #9197 （下），对未处理或经毛喉素处理和 FGF 处理的 SK-N-MC 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb（上）和 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487（下），对已经 Brefeldin A #9972（10 ng/ml，90 分钟；+）处理和利用构建表达全长人源 ApoE2 (hApoE2; +)、ApoE3 (hApoE3; +) 或 ApoE4 (hApoE4; +) 进行空载的 (-) 或转染的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的来自 C57BL/6NTac 小鼠（wt/wt，模型 #B6-F，上图）或 APOE4 敲入型小鼠（hu/hu，模型#1549-F，下图）的肝脏（左图）或脑（右图）进行免疫组织化学分析。Taconic Biosciences, Inc. 的小鼠
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 LRP1 (E2Q7S) Rabbit mAb（绿色）和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700（红色）对 MEF-1 细胞（左图，LRP1 (+/+)，阳性）和 PEA 13 细胞（右图，LRP1 (-/-)，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb（红色）和 Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835（绿色），对大鼠小脑和视网膜细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人小脑组织进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Phospho-AMPA 受体 1 (GluA1) (Ser831) (A5O2P) Rabbit mAb（上图）和 AMPA 受体 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb #13185（下图），对未经 (-) 或已经 λ 磷酸酶 (+) 处理的小鼠脑细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    对 SK-N-MC 细胞提取物中的 CREB 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 CREB (48H2) Rabbit mAb，泳道 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP2® Isotype Control #3900，泳道 3 为 10% input。使用 CREB (86B10) Mouse mAb #9104 进行蛋白质印迹分析。Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 用作二抗。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析，并显示胞核染色。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb（泳道 3），对小鼠脑提取物中的 AMPA Receptor (GluA1) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® 同型对照 #3900（泳道2）或 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb（泳道3），对经 Brefeldin A #9972（10 ng/ml，90分钟）处理的 Hep G2 细胞 ApoE 进行免疫沉淀法。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体脾脏进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑皮质进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 CREB (48H2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人星形细胞瘤进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb，对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人小肠进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的大鼠视网膜进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 CREB (48H2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    在对照肽（左）或 Phospho-CREB (Ser133) Blocking Peptide #1090（右）存在的情况下，使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 AMPA Receptor 1 (GluA1) (D4N9V) Rabbit mAb（绿色），对小鼠海马进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    在对照物肽（左）和抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人体皮肤进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Synapsin-1 (D12G5) XP® Rabbit mAb（绿色）和 β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb #4466（红色），对小鼠脑进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 CREB (48H2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非霍奇金淋巴瘤进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb，对未处理（左）或经 IBMX 及毛喉素处理（右）的石蜡包埋的 SK-N-MC 细胞进行的免疫组织化学分析，显示诱导的胞核着染。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb，对石蜡包埋的293T 细胞沉淀物对照（左上图）或经人 ApoE 同工型ApoE2、ApoE3 和 ApoE4（右下图）转染的 293T 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 CREB (48H2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb，对未处理（左）或 λ 磷酸酶处理（右）的石蜡包埋的人肾细胞癌进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 Hep G2 细胞沉淀物（左图，阳性）或 293T 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    对用 CREB (48H2) Rabbit mAb（红色）和 Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835（绿色）标记的小鼠小脑细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 45 Expand Image
    对用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb（红色）、Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb #2835（蓝色）和 Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) (2F9) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4854 标记的接受假手术（左图）或让之缺血 15 分钟随后再灌注 30 分钟（中图）和 4 小时（右图）的大鼠齿状回细胞进行共聚焦免疫荧光图像分析。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 46 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb #13366（绿色）对 Hep G2 细胞（左图，阳性）和 293T 细胞（右图，阴性）进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight™ 554 Phalloidin #13054（红色）标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 47 Expand Image
    使用与同工型对照物 (B) 相对的 CREB (48H2) Rabbit mAb（A，红色），对显示胞核染色的 SK-N-MC 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5®（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 48 Expand Image
    与未处理细胞（右）相比，使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb（左，红），对 Forskolin 和 IBMX 处理 25 分钟后显示核染色的 SK-N-MC 细胞进行共聚焦显微镜图像。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 49 Expand Image
    相比浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）， 使用 CREB (48H2) Rabbit mAb（实线）对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 50 Expand Image
    使用 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）对未经过处理（蓝色）或经过 TPA #4174 (500nM) 和碘霉素#9995（1 µM，4 小时；绿色）处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 51 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经 Forskolin #3828 (30 μM) 处理 1 小时的 293 细胞的交联染色质与 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb 或 CREB (48H2) Rabbit mAb (#9197) 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示与 NR4A3 结合，NR4A3 是磷酸 CREB 和 CREB 的一个已知靶标基因（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 52 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对经 Forskolin #3828（30 μM，1 小时）处理的 293 细胞的交联染色质与 10 μl CREB (48H2) Rabbit mAb 或 2 μl Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用人 ALS2 外显子 1 引物、SimpleChIP® Human NR4A3 Promoter Primers #4829 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 53 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对经 Forskolin #3828 (30 μM) 处理 1 小时的 293 细胞的交联染色质与 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb 或 CREB (48H2) Rabbit mAb (#9197) 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体9（上图）内的结合，包括 Phospho-CREB 和 CREB 的已知靶标基因 NR4A3 （下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 54 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对经 Forskolin #3828 (30 μM) 处理 1 小时的 293 细胞的交联染色质与 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用人 ALS2 外显子 1 引物、SimpleChIP® Human NR4A3 Promoter Primers #4829 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 55 Expand Image
    使用 ApoE (pan) (D7I9N) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对 HepG2 细胞提取物（泳道 1）、空载转染（泳道 2）或经表达 ApoE4 的构建体瞬时转染（泳道 3）的 293T 细胞的提取物、野生型 C57BL/6NTac 模型 #B6-F 小鼠（泳道 4）或 ApoE4 敲入型小鼠（模型 1549-F）（泳道 5）的全肝提取物、野生型 C57BL/6NTac 小鼠（泳道 6）或 ApoE4 敲入型小鼠（泳道 7）的全脑提取物进行蛋白质印迹分析。Taconic Biosciences, Inc. 的小鼠
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 56 Expand Image
    使用经 Forskolin # 3828 (30 μm) 处理 1h 的 293 细胞和 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit Mab，通过 CUT&RUN Assay Kit #86652进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 NR4A3 基因内结合。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 57 Expand Image
    使用经 Forskolin # 3828 (30 μm) 处理 1h 的 293 细胞和 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit Mab，通过 CUT&RUN Assay Kit #86652进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® ChIP-seq DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-Seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 9号染色体（上图）内的结合，包括 NR4A3 基因（下图）。
    ApoE Synaptic Formation and Signaling Pathway Antibody Sampler Kit: Image 58 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit #86652，通过用 Forskolin #3828 (30 μM) 处理 1h 的293 细胞和 Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362，进行CUT&RUN。使用人源ALS2 外显子 1 引物和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
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