Revision 10
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Applications:

WB, W-S, IP, IHC-P, IF-IC, FC-FP, ChIP, ChIP-seq, C&R

REACTIVITY:

H

SENSITIVITY:

Endogenous

MW (kDa):

110

Source/Isotype:

Rabbit IgG

UniProt ID:

#P10275

Entrez-Gene Id:

367

Product Information

Product Usage Information

For optimal ChIP and ChIP-seq results, use 5 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

The CUT&RUN dilution was determined using the CUT&RUN Assay Kit #86652.
Application Dilution
Western Blotting 1:2000
Simple Western™ 1:50 - 1:250
Immunoprecipitation 1:50
Immunohistochemistry (Paraffin) 1:200 - 1:800
Immunofluorescence (Immunocytochemistry) 1:600 - 1:1200
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) 1:400 - 1:800
Chromatin IP 1:100
Chromatin IP-seq 1:100
CUT&RUN 1:100

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

For a carrier free (BSA and azide free) version of this product see product #23791.

Specificity / Sensitivity

Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb detects endogenous levels of total androgen receptor protein.

Species Reactivity:

Human

Source / Purification

Monoclonal antibody is produced by immunizing animals with recombinant protein corresponding to residues near the amino terminal region of human androgen receptor protein.

Background

Androgen receptor (AR), a zinc finger transcription factor belonging to the nuclear receptor superfamily, is activated by phosphorylation and dimerization upon ligand binding (1). This promotes nuclear localization and binding of AR to androgen response elements in androgen target genes. Research studies have shown that AR plays a crucial role in several stages of male development and the progression of prostate cancer (2,3).

  1. Li, J. and Al-Azzawi, F. (2009) Maturitas 63, 142-8.
  2. Avila, D.M. et al. (2001) J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 76, 135-142.
  3. Montgomery, J.S. et al. (2001) J. Pathol. 195, 138-146.

Species Reactivity

Species reactivity is determined by testing in at least one approved application (e.g., western blot).

Western Blot Buffer

IMPORTANT: For western blots, incubate membrane with diluted primary antibody in 5% w/v nonfat dry milk, 1X TBS, 0.1% Tween® 20 at 4°C with gentle shaking, overnight.

Applications Key

WB: Western Blotting W-S: Simple Western™ IP: Immunoprecipitation IHC-P: Immunohistochemistry (Paraffin) IF-IC: Immunofluorescence (Immunocytochemistry) FC-FP: Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) ChIP: Chromatin IP ChIP-seq: Chromatin IP-seq C&R: CUT&RUN

Cross-Reactivity Key

H: human M: mouse R: rat Hm: hamster Mk: monkey Vir: virus Mi: mink C: chicken Dm: D. melanogaster X: Xenopus Z: zebrafish B: bovine Dg: dog Pg: pig Sc: S. cerevisiae Ce: C. elegans Hr: horse GP: Guinea Pig Rab: rabbit All: all species expected

Trademarks and Patents

Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

限制使用

除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

Revision 10
#5153

Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb

Western Blotting Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb(下图)对 LNCaP (AR+)、VCaP (AR & AR-V7+)、22Rv1 (AR & AR-V7+) 和 PC-3 (AR-) 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
Western Blotting Image 2: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(上图)和 β-Actin Antibody #4967(下图)对 LNCaP (AR+)、MCF7 (AR+)、PC-3 (AR-) 和 DU 145 (AR-) 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Western Blotting Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb #5153 对 LNCaP 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:50(蓝线)和 1:250(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
No image available
Immunohistochemistry Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 LNCaP(AR+,左图)和 DU145(AR-,右图)进行免疫组织化学分析。
Immunohistochemistry Image 2: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人前列腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
Immunofluorescence Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(绿色),对 LNCaP(阳性,左)和 DU145(阴性,右)细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。
Flow Cytometry Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 DU-145 细胞(蓝色)和 LNCaP 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Chromatin Immunoprecipitation Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 3 天,随后用双氢睾酮 (DHT,10 nM) 处理 4 小时的 LNCaP 细胞的交联染色质与雄激素受体 (D6F11) XP® 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在雄激素受体的已知靶基因 KLK2 内结合(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。欲知其他 ChIP-seq 情况,请下载产品说明书。
Chromatin Immunoprecipitation Image 2: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® 酶解染色质免疫共沉淀试剂盒(磁珠法) #9005 对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中生长 3 天,随后用双氢睾酮 (DHT,10 nM) 处理 4 小时的 LNCaP 细胞的交联染色质与雄激素受体 (D6F11) XP® 兔单克隆抗体进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示了染色体 19(上图)内的结合,包括雄激素受体的已知靶基因 KLK2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
Chromatin Immunoprecipitation Image 3: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005,对在无酚红培养基和 5% 炭剥离的 FBS 中培养 3天,随后用 双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞中提取的交联染色质,在加入 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729​ 后,进行染色质免疫沉淀。使用 using SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers #62086, SimpleChIP® Human KLK3 Promoter Primers #32784 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486, 通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
CUT and RUN Image 1: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了雄激素受体的已知靶基因 KLK2 内的结合(参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图)。
CUT and RUN Image 2: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示了染色体 19(上图)内的结合,包括雄激素受体的已知靶基因 KLK2(下图)(参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)。
CUT and RUN Image 3: Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb Expand Image
使用 CUT&RUN Assay Kit #66362,对在无酚红色培养基和 5% 活性炭炭剥离的 FBS 生长 3 天后再用双氢睾酮(DHT,10 nM)处理 4 小时的 LNCaP 细胞和 Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #86652 进行 CUT&RUN 分析。使用 SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers #62086 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时聚合酶链反应 (PCR) 对富集 DNA 进行量化分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。