Revision 1

#12589Store at -20C

1 个试剂盒

(7 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

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Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 3676 20 µl 280 kDa Rabbit IgG
Adiponectin (C45B10) Rabbit mAb 2789 20 µl 27 kDa Rabbit IgG
C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 8178 20 µl 42, 28 kDa Rabbit IgG
FABP4 Antibody 2120 20 µl 15 kDa Rabbit 
Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 3180 20 µl 273 kDa Rabbit IgG
Perilipin-1 (D1D8) XP® Rabbit mAb 9349 20 µl 62 kDa Rabbit IgG
PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 2435 20 µl 53, 57 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit provides an economical means to evaluate proteins involved in the regulation of adipogenesis. The kit includes enough antibody to perform two western blot experiments with each primary antibody.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Adipocytes are the primary cellular component of adipose tissue and play a key role in the storage of triacylglycerol. Adipogenesis is the cellular process where preadipocytes differentiate into adipocytes.

Fatty acid binding proteins (FABPs) act as cytoplasmic lipid chaperones by binding fatty acids and lipids for transport to various cellular pathways (1,2). The predominant fatty acid binding protein found in adipocytes is FABP4.

Adiponectin is an adipokine expressed exclusively in brown and white adipocytes and is secreted into the blood. It exists in three major forms: a low molecular weight trimer, a medium molecular weight hexamer and a high molecular weight multimer (3). Decreased adiponectin levels are seen in obese and insulin-resistant mice and humans (4), suggesting that this adipokine is critical for maintenance of insulin sensitivity.

Peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) is a transcriptional activator preferentially expressed in adipocytes, vascular smooth muscle cells, and macrophages (5,6).

Acetyl-CoA carboxylase (ACC) is a key fatty acid biosynthesis and oxidation enzyme that is responsible for the carboxylation of acetyl-CoA to malonyl-CoA, (7). Phosphorylation of acetyl-CoA carboxylase by AMPK at Ser79 or by PKA at Ser1200 inhibits ACC enzymatic activity (8). ACC is a potential target of anti-obesity drugs (9,10).

CCAAT/enhancer-binding proteins (C/EBPs) transcription factors are critical for cellular differentiation, terminal function, and the inflammatory response (11). Phosphorylation of C/EBPα at Thr222, Thr226, and Ser230 by GSK-3 may be required for adipogenesis (12).

Perilipin localizes to the periphery of lipid droplets and serves as a protective coating against lipases. Evidence suggests that PKA regulates lipolysis by phosphorylating perilipin (13-17), resulting in a conformational change that exposes lipid droplets to endogenous, hormone-sensitive lipases (14). Hence, perilipin plays a pivotal role in lipid storage (14,17).

Fatty acid synthase (FASN) catalyzes the synthesis of long-chain fatty acids from acetyl-CoA and malonyl-CoA. FASN is active as a homodimer with seven different catalytic activities and produces lipids in the liver for export to metabolically active tissues or storage in adipose tissue. In most other human tissues, FASN is minimally expressed since they rely on circulating fatty acids for new structural lipid synthesis (18).

  1. Tuncman, G. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103, 6970-5.
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Background References

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    Revision 1
    #12589

    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit

    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对 NIH/3T3 和 3T3-L1 细胞(分化 6 天成为脂肪细胞)的提取物进行蛋白印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对未分化(左)或已分化(右)的 3T3-L1 细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠褐色脂肪进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用在分化细胞中显示胞核定位的 PPARγ (C26H12A8) Rabbit mAb(红色)对 3T3-L1 进行共聚焦免疫荧光分析。用 BODIPY 493/503(绿色)标记脂肪滴。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    Simple Western️ analysis of lysates (1mg/mL) from 3T3 cells using Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb #3676. 虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 66-440 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess Simple Western 仪器上进行该实验。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    对分化 4 天的 3T3-L1 细胞提取物的 perilipin-1 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Perilipin-1 (D1D8) XP® Rabbit mAb。Mouse Anti-rabbit IgG (Light-Chain Specific) (L57A3) mAb #3677 和 Anti-mouse IgG, HRP-linked Antibody #7076 可用作二抗。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 FABP4 Antibody 对 NIH/3T3 和 3T3-L1 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。该图显示结合遍及 FOXN3(PPARγ 的已知靶标基因) 。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    使用 Adiponectin (C45B10) Rabbit mAb 对 NIH/3T3 和 3T3-L1 细胞(分化成为脂肪细胞)的提取物进行蛋白印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对不同细胞系细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 对 Hep G2 和 LNCaP 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 人周脂素-1 (D1D8) XP® 兔单克隆抗体(上图)和 β-肌动蛋白抗体 #4967(下图)对人前脂肪细胞和脂肪细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀分析。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 文库。该图显示结合遍及染色体 14(上图),包括 FOXN3( PPARγ 的已知靶标基因)(下图)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    对 HeLa 细胞提取物的乙酰辅酶 A 羧化酶进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,并且泳道 3 是 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb。使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肺进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    使用 人周脂素-1 (D1D8) XP® 兔单克隆抗体 对石蜡包埋的乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。标注脂肪细胞的特异性染色。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对 HDLM-2 细胞的交联染色质与 PPARγ (C26H12) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀分析。使用 SimpleChIP® Human FOXN3 Intron 3 Primers #95568、human STON2 intron 4 primers 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的肝细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    在对照肽(左)或 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Blocking Peptide #1062(右)存在的情况下,使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的细胞沉淀物 THP-1(左)或 Jurkat(右)进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    在添加对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)的情况下,使用 人周脂素-1 (D1D8) XP® 兔单克隆抗体 对石蜡包埋的小鼠褐色脂肪细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在对照肽(左)和抗原特异性肽(右)存在的情况下,使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肝细胞癌进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Perilipin-1 (D1D8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠肾脏进行免疫组织化学分析,并对相邻的脂肪组织进行染色。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对显示脂肪细胞染色的石蜡包埋的淋巴瘤细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人扁桃体进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Perilipin-1 (D1D8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺进行免疫组织化学分析,并对相邻的脂肪组织进行染色。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠褐色脂肪进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肝细胞癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb(绿)对 THP-1(左)和 Jurkat(右)进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Perilipin-1 (D1D8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠睾丸进行免疫组织化学分析,并对相邻的脂肪组织进行染色。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 C/EBPα (D56F10) XP® Rabbit mAb(绿)对分化的 3T3-L1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 人周脂素-1 (D1D8) XP® 兔单克隆抗体(绿色)对冷冻的小鼠褐色脂肪组织进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAb(绿色)对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    对用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb(红色)标记的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = Draq5(DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 Perilipin (D1D8) Rabbit mAb(绿色)对差异 8 天的 3T3-L1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 SK-BR-3 细胞(蓝色)和 HT-29 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    Adipogenesis Marker Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(红色)作为对照,使用 C/EBP-α (D56F10) XP® Rabbit mAb(蓝色)对 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。