Revision 1

#9933Store at -20C

1 个试剂盒

(8 x 20 microliters)

Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
Product Includes Product # Quantity Mol. Wt Isotype/Source
Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb 12799 20 µl 14 kDa Rabbit IgG
Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody 2576 20 µl 14 kDa Rabbit 
Histone H2A (D6O3A) Rabbit mAb 12349 20 µl 14 kDa Rabbit IgG
Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 12364 20 µl 14 kDa Rabbit IgG
Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 9649 20 µl 17 kDa Rabbit IgG
Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 4499 20 µl 17 kDa Rabbit IgG
Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody 2594 20 µl 11 kDa Rabbit 
Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 13919 20 µl 11 kDa Rabbit IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl Goat 

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

The Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit provides a fast and economical means of evaluating the acetylation states of histones H2A, H2B, H3 and H4. The kit contains enough primary and secondary antibodies to perform two Western blot experiments.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

Modulation of chromatin structure plays an important role in the regulation of transcription in eukaryotes. The nucleosome, made up of DNA wound around eight core histone proteins (two each of H2A, H2B, H3, and H4), is the primary building block of chromatin (1). The amino-terminal tails of core histones undergo various posttranslational modifications, including acetylation, phosphorylation, methylation, and ubiquitination (2-5). These modifications occur in response to various stimuli and have a direct effect on the accessibility of chromatin to transcription factors and, therefore, gene expression (6). In most species, histone H2B is primarily acetylated at Lys5, 12, 15, and 20 (4,7). Histone H3 is primarily acetylated at Lys9, 14, 18, 23, 27, and 56. Acetylation of H3 at Lys9 appears to have a dominant role in histone deposition and chromatin assembly in some organisms (2,3). Phosphorylation at Ser10, Ser28, and Thr11 of histone H3 is tightly correlated with chromosome condensation during both mitosis and meiosis (8-10). Phosphorylation at Thr3 of histone H3 is highly conserved among many species and is catalyzed by the kinase haspin. Immunostaining with phospho-specific antibodies in mammalian cells reveals mitotic phosphorylation at Thr3 of H3 in prophase and its dephosphorylation during anaphase (11).

  1. Workman, J.L. and Kingston, R.E. (1998) Annu Rev Biochem 67, 545-79.
  2. Hansen, J.C. et al. (1998) Biochemistry 37, 17637-41.
  3. Strahl, B.D. and Allis, C.D. (2000) Nature 403, 41-5.
  4. Cheung, P. et al. (2000) Cell 103, 263-71.
  5. Bernstein, B.E. and Schreiber, S.L. (2002) Chem Biol 9, 1167-73.
  6. Jaskelioff, M. and Peterson, C.L. (2003) Nat Cell Biol 5, 395-9.
  7. Thorne, A.W. et al. (1990) Eur J Biochem 193, 701-13.
  8. Hendzel, M.J. et al. (1997) Chromosoma 106, 348-60.
  9. Goto, H. et al. (1999) J Biol Chem 274, 25543-9.
  10. Preuss, U. et al. (2003) Nucleic Acids Res 31, 878-85.
  11. Dai, J. et al. (2005) Genes Dev 19, 472-88.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    U.S. Patent No. 7,429,487, foreign equivalents, and child patents deriving therefrom.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意，否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件，除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受， 否书均被拒书，并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明， 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的， 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专，且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的， 或专专售（专独或作专专成）或其他商专目的而专专专品，均需要 CST 的专独专可。客专：(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品，或使用专品制造任何商专专品，(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专，或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专， (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专，(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品， (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。
    Revision 1
    #9933

    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit

    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 1 Expand Image
    使用 Histone H2A (D6O3A) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 2 Expand Image
    使用 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 3 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb（上图）或 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb #12364（下图）对未经 (-) 或经 Trichostatin A (TSA) #9950 处理（1 μM，18 小时；+）的 HeLa 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 4 Expand Image
    使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 5 Expand Image
    使用 #2576 Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody 对未经或经 TSA 处理（400 nM，12 小时）对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 6 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody 对未经或经 TSA 处理（400 nM TSA，12 小时）的不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 7 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 8 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 9 Expand Image
    一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 10 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 对未经或经 TSA 处理（400 nM，18 小时）的 HeLa 和 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 11 Expand Image
    CUT&Tag was performed with HeLa cells and Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb, using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figure shows binding across GAPDH, a known target gene of H3K9ac (see our ChIP-qPCR figure).
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 12 Expand Image
    使用 Histone H2A (D6O3A) Rabbit mAb（绿色）对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 13 Expand Image
    使用 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 14 Expand Image
    使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 9950）或 Acetyl-Histone H2B (D5H1S) XP® Rabbit mAb（泳道 3）对经 Trichostatin A (TSA) #2 处理（1 μM，18 小时）的 Hela 细胞提取物的乙酰化组蛋白 H2B 进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Acetyl-Histone H2B (D5H1S) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 15 Expand Image
    使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺导管内原位癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 16 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody 对显示胞核定位的石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学染色分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 17 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 4T1 同基因乳腺肿瘤组织进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 18 Expand Image
    在非乙酰肽（左图）或 K9 乙酰肽（右图）存在的情况下，使用 Acetyl-Histone H3 (K9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胃癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 19 Expand Image
    CUT&Tag was performed with HeLa cells (Untreated) and Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb, using CUT&Tag Assay Kit #77552. DNA library was prepared using CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems #47415. The figures show binding across chromosome 12 (upper), including GAPDH (lower), a known target gene of H3K9ac (see our ChIP-qPCR figure).
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 20 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Histone H2A (D6O3A) Rabbit mAb 或Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human MYT-1 Exon 1 Primers #4493和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 21 Expand Image
    使用 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 22 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 23 Expand Image
    使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 24 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb（绿色）和 β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #2116（红色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 25 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 LL/2 同基因肿瘤组织进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 26 Expand Image
    在对照肽（左图）和抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 27 Expand Image
    在非乙酰肽（左图）或 Lys5 乙酰肽（右图）存在的情况下，使用 Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 28 Expand Image
    使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠结肠细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 29 Expand Image
    以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb（实线）对 Hela 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 30 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑组织进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 31 Expand Image
    使用 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Histone H2B (D2H6) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human MYT-1 Exon 1 Primers #4493和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 32 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb（绿色）对未经（右图）或经 Trichostatin A (TSA) #9950（左图）处理的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 33 Expand Image
    在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人非小细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 34 Expand Image
    使用 Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的恒河猴肝组织进行免疫组织化学分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 35 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human MyoD1 Exon 1 Primers #4490 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 36 Expand Image
    使用 Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb（绿色）和 COX IV (4D11-B3-E8) Mouse mAb #11967（红色）对 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 37 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb（绿色）对未经（左图）或经 TSA #9950（右图）处理的 Hela 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 38 Expand Image
    使用 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb #9649 对照碘化丙啶（DNA 含量）对未处理的 Hela 细胞进行流式细胞分析。注意周期细胞的阳性染色（盒）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 39 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 HeLa 细胞中提取的交联染色质，在加入 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。本图显示整个 GAPDH （H3K9Ac 的一个已知靶标基因）范围内的结合作用（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 40 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005，对 HeLa 细胞中提取的交联染色质，在加入 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体12（上图）内的结合，包括 H3K9Ac 的已知靶标基因 GAPDH（下图）（参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 41 Expand Image
    使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003 对 Hela 细胞中提取的交联染色质，在加入 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后，进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516、SimpleChIP® Human MyoD1 Exon 1 Primers #4490 以及 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行量化。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 42 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit # 86652，通过 HeLa 细胞和Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 H3K9Ac 的已知靶标基因 GAPDH 内的结合（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 43 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit # 86652，通过 HeLa 细胞和Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在染色体 12（上图）内的结合，包括 H3K9Ac 的已知靶标基因 GAPDH（下图）（参见包含 CUT&RUN-qPCR 数据的其他结果图）。
    Acetyl-Histone Antibody Sampler Kit: Image 44 Expand Image
    使用 CUT&RUN Assay Kit # ‚86652 ，通过 Hela 细胞和 Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human RPL30 Exon 3 Primers #7014、SimpleChIP® Human GAPDH Exon 1 Primers #5516和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486，通过实时 PCR 对富集 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量（等于 1）的信号。
    图像库
    更多了解我们如何获得图像
    Orders: 877-616-CELL (2355)•[email protected]• Support: 877-678-TECH (8324)•[email protected]• Web: cellsignal.com
    仅供研究使用。不得用于诊断流程。