Revision 1
Cell Signaling Technology

Orders: 877-616-CELL (2355) [email protected]

Support: 877-678-TECH (8324)

Web: [email protected] cellsignal.com

3 Trask LaneDanversMassachusetts01923USA
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.
:

:

:

:

UniProt ID:

#Q9UHD2

Entrez-Gene Id:

29110

Product Includes Quantity Reactivity MW(kDa) Isotype
Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb 5483 100 µl H M 84 Rabbit IgG
TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb 38066 100 µl H M R 84 Rabbit IgG

Please visit cellsignal.com for individual component applications, species cross-reactivity, dilutions, protocols, and additional product information.

Description

PhosphoPlus® Duets from Cell Signaling Technology (CST) provide a means to assess protein activation status. Each Duet contains an activation-state and total protein antibody to your target of interest. These antibodies have been selected from CST's product offering based upon superior performance in specified applications.

Storage

Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.

Background

TBK1 (TANK-binding kinase 1)/NAK (NF-κB activating kinase) is an IκB kinase (IKK)-activating kinase and can activate IKK through direct phosphorylation (1). TBK1 was identified through association with the TRAF binding protein, TANK, and found to function upstream of NIK and IKK in the activation of NF-κB (2). TBK1 induces IκB degradation and NF-κB activity through IKKβ. TBK1 may mediate IKK and NF-κB activation in response to growth factors that stimulate PKCε activity (1). TBK1 plays a pivotal role in the activation of IRF3 in the innate immune response (3).

  1. Tojima, Y. et al. (2000) Nature 404, 778-82.
  2. Pomerantz, J.L. and Baltimore, D. (1999) EMBO J 18, 6694-704.
  3. Fitzgerald, K.A. et al. (2003) Nat Immunol 4, 491-6.

Background References

    Trademarks and Patents

    Cell Signaling Technology is a trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    PhosphoPlus is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    XP is a registered trademark of Cell Signaling Technology, Inc.
    All other trademarks are the property of their respective owners. Visit cellsignal.com/trademarks for more information.

    限制使用

    除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。 任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受, 否书均被拒书,并且无效。

    专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明, 且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的, 或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的, 或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、 出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、 反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专, (c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据 CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品, (e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专

    Revision 1
    #61223

    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet

    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 1 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对野生型 (+/+) 或 TBK1/NAK 敲除型 (-/-) HCT 116 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 2 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(上图)或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504(下图)对用 TPA #4174(80 nM,过夜)分化后用 LPS (1 μg/ml) 处理长达 24 小时的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 3 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 4 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(上图)或总 TBK1/NAK (D1B4) Rabbit mAb #3504(下图)对用 TPA #4174(80 nM,过夜)分化后用 LPS(1 μg/ml,1 小时)处理、未经处理或已经磷酸酶处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 5 Expand Image
    对 Raji 细胞提取物 TBK1/NAK 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb。使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 6 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb 对 WT(左图)或 TBK1 KO(右图)的 U20S 提取物进行蛋白质印迹法分析。用 Ponceau S 染色的膜进行总蛋白标准化(下图)。这些数据由 YCharOS Inc. 提供,该公司是一家开放科学公司,作为 CST 科学家生成的验证数据的合作伙伴,其使命是表征市售抗体。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 7 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(绿色)对用 TPA #4174(80nM,过夜)(左图)处理后用 LPS(1μg/ml,1 小时)(中图)处理或用 LPS 和 λ 磷酸酶处理(右图)的 THP-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 DY-554 Phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 8 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb(绿色)对野生型(左图,阳性)或 TBK1/NAK 敲除型(右图,阴性)HCT 116 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝已带有 Alexa Fluor® 555 Phalloidin #8953(红色)标记。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961(蓝色)封片。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 9 Expand Image
    使用 Phospho-TBK1/NAK (Ser172) (D52C2) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对用 TPA(80 nM,4 天)#9905 分化、未经处理(蓝色)或已经过 LPS(1 ug/ml,1 小时;绿色)#14011 处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
    PhosphoPlus® TBK1/NAK (Ser172) Antibody Duet: Image 10 Expand Image
    使用 TBK1/NAK (E8I3G) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对 TALL-1 细胞(蓝色,阴性)和 Raji 细胞(绿色,阳性)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。