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38725
CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
偶联抗体
单克隆抗体

CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #38725

引用 (1)
筛选器:
  1. F
Flow Cytometry Image 1: CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

使用 CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)(实线)或浓度匹配的 Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4878(虚线),对 Ramos 细胞(蓝色)和 WERI-Rb-1 细胞(绿色)进行流式细胞分析。

购买 # 38725S
产品货号 规格 价格 库存
38725S
100 µl (50 次测试)

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支持数据

反应性 H
敏感性 内源性
MW (kDa)
来源/亚型 小鼠 IgG3

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品说明

Cell Signaling Technology 的这种抗体接合 Alexa Fluor® 488 荧光染料,并可对人体细胞进行直接的流式细胞分析内部检测。该抗体的物种交叉反应性预计与非偶联的 CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) #60577 相同。

产品使用信息

应用 稀释度
流式细胞术 1:50

保存

保存在 PBS(pH 为 7.2)、低于 0.1 % 的叠氮化钠和 2 mg/ml BSA 中。储存在 4°C。请不要分装抗体。避光保存。切勿冷冻。

实验步骤

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流式细胞术,针对直接结合抗体的活细胞实验步骤

A. 溶液和试剂

注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。

  1. 1X 磷酸盐缓冲液 (PBS):要制备 1 L 1X PBS:添加 100 ml 10X PBS (#12528) 到 900 ml 水中混合。
  2. 抗体稀释缓冲液:购买即用型流式细胞术抗体稀释缓冲液 (#13616),或在 100 ml 1x PBS 中溶解 0.5 g 牛血清白蛋白 (BSA) (#9998) 来制备 0.5 % BSA PBS 缓冲液。储存在 4°C。

注意:在您的实验中加入荧光细胞染料(包括活性染料、DNA 染料等)时,请参考染料产品页,了解建议的实验步骤。访问 www.cellsignal.com,了解经流式细胞术验证的细胞染料完整列表

B. 免疫染色

:使用血细胞计数器或备选方法计数细胞。

注意:如果使用全血,则需裂解红血细胞,并在免疫染色之前通过离心分离洗涤。

注意:理想的离心条件根据细胞类型和试剂容量有所不同。一般,1-5 分钟 150-300g 将足以使细胞沉淀。

  1. 将所需数量的细胞分装进试管或加样孔中。(通常,每次实验 5 x 105 至 1 x 106 个细胞。)
  2. 进行离心使细胞沉淀,并去除上清液。
  3. 在 100 µl 稀释的一抗中重悬细胞,稀释的一抗按建议的稀释度或根据滴定确定用抗体稀释缓冲液制备。
  4. 在冰上孵育 30 分钟至 1 小时。避光保存。
  5. 用抗体稀释缓冲液进行离心洗涤。丢弃上清液。重复操作。
  6. 在 200-500 μl 抗体稀释缓冲液中重悬细胞后用流式细胞分析仪进行分析。

发布​于 2017 年 6 月 

修订于 2020 年 6 月

实验步骤编号:1504

特异性/敏感性

CD133 (A8N6N) Mouse mAb (Flow Specific) (Alexa Fluor® 488 Conjugate) 可识别内源水平的 CD133 总蛋白。

物种反应性:

来源/纯化

使用人 CD133 蛋白过表达的细胞,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

CD133(也称为 Prominin)首先被描述为在假定造血干细胞上经单克隆抗体 AC133 检测的一种细胞表面标志物 (1)。后续 cDNA 克隆表明,CD133 是一种五跨膜蛋白,预测其分子量为 97 kDa。由于高度糖基化,经 SDS-PAGE 分析测定其表观分子量为 130 kDa (2)。除了造血干细胞,CD133 还在其他干细胞中表达,并且用于分离其他干细胞,包括癌症干细胞 (3-7)。CD133 的缺失突变会引发蛋白定位异常,进而导致人视网膜变性 (8)。

  1. Yin, A.H. et al. (1997) Blood 90, 5002-12.
  2. Miraglia, S. et al. (1997) Blood 90, 5013-21.
  3. Handgretinger, R. et al. (2003) Ann N Y Acad Sci 996, 141-51.
  4. Monzani, E. et al. (2007) Eur J Cancer 43, 935-46.
  5. O'Brien, C.A. et al. (2007) Nature 445, 106-10.
  6. Ricci-Vitiani, L. et al. (2007) Nature 445, 111-5.
  7. Singh, S.K. et al. (2004) Nature 432, 396-401.
  8. Maw, M.A. et al. (2000) Hum. Mol. Genet. 9, 27-34.

通路和蛋白

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
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