SignalStar^™ Multiplex IHC 常见问题

问题

• 如何验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂？
• 该测定法是否对冷冻组织有效？
• 你们是否有抗小鼠抗体可提供？
• 我没在你们的可提供抗体菜单中看到我感兴趣的目标。我还能以某种方式在我的检测板中使用它吗？
• 我能否将此检测中使用的抗体与直接偶联物组合？
• 将我的 SignalStar 染色与序列切片上的显色性染色比较时，我看到更多阳性细胞。我如何知道这种过度染色是否正确？
• 完成染色后我可能等多久才对切片成像？
• 我是否需要针对自己正在使用的组织类型优化 SignalStar 试剂盒和试剂？
• 该测定法中应包括哪种适当的阳性对照？是否需要多个对照？

回答

如何验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂？

CST 彻底验证了 SignalStar Multiplex IHC Panel Builder 菜单中可提供的每种抗体。通过滴定和荧光团配对以及在两轮成像中测试抗体的各种组合。对各种肿瘤和组织类型进行测试。我们还严格测试了传统显色测定法中使用的亲本抗体，因这些抗体充当这种荧光测定法的基础。

该测定法是否对冷冻组织有效？

尚未验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒与试剂用于冷冻组织。我们正处于验证我公司抗体和实验步骤用于新鲜组织或冷冻组织的流程中。

你们是否有抗小鼠抗体可提供？

尚未验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂用于小鼠组织。我们正处于验证小鼠反应性抗体的流程中。

我没在你们的可提供抗体菜单中看到我感兴趣的目标。我还能以某种方式在我的检测板中使用它吗？

尚未验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂配合我公司菜单以外的抗体使用。我们正在处于开发诸多定制解决方案以便在 SignalStar Multiplex IHC 测定法中使用您自有抗体的流程中。

我能否将此检测中使用的抗体与直接偶联物组合？

尚未验证 SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂与直接偶联物组合使用。有可能将直接偶联物并入您的实验步骤。然而，由于 SignalStar 试剂受益于荧光信号放大，因此可能存在光谱渗出，后者因使用偶联物未放大的测定法产生。

将我的 SignalStar 染色与序列切片上的显色性染色比较时，我看到更多阳性细胞。我如何知道这种过度染色是否正确？

在优化期间，我们发现荧光染色可能显示比显色性染色更高的阳性百分比。为确保任何过度染色为特异性，请确认用其他染色剂证明亚细胞定位和共定位正确。例如，如果所有 CD8^＋ 细胞都为 CD3^＋，则任何与显色性染色相比的 CD8^＋过度染色很可能是正确的。

完成染色后我可能等多久才对切片成像？

对于第 1 轮成像，在完成染色后 8 小时内成像时，染色应显示稳定信号。对于第 2 轮成像，成像应尽可能接近于染色完成时进行，但是应当保持稳定长达 8 小时。

我是否需要针对自己正在使用的组织类型优化 SignalStar 试剂盒和试剂？

SignalStar Multiplex IHC 试剂盒和试剂已针对抗体的荧光团配对和顺序作了优化。由于组织在靶标的质量和表达水平方面不同，将您的检验组合中抗体的浓度升高 2 倍或降低 0.5 倍可能有助在您的实验中实现最佳信号。

该测定法中应包括哪种适当的阳性对照？是否需要多个对照？

通过显色性 IHC 证明每个靶标呈阳性的任何组织都可以充当阳性对照组织。因此，每个靶标都将要求阳性对照，这有时可能导致多个对照必不可少。为了最佳比较，各切片应尽可能连续。

如有任何其他问题，请发送电子邮件至 [受保护的电子邮箱]，直接联系我们的 SignalStar 小组。